NY_T 3142-2017饲料中溴吡斯的明的测定 液相色谱-串联质谱法.pdf

ICS 65.120B 46NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 3142—2017饲料中溴吡斯的明的测定液相色谱一串联质谱法Determination of pyridostigmine bromide in feeds-Liquid chromatography-tandem mass spectrometry2017-12-22 发布2018-06-01实施旺中+中华人民共和国农业部发布FE NY/T3142—2017前 言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由农业部畜牧业司提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76)归口。本标准起草单位：广东省农业科学院农产品公共监测中心-本标准主要起草人：何绮霞、王威利、张展、续倩、吴维輝、林雪贤、殷秋妙。 NY/T3142—2017饲料中溴吡斯的明的测定液相色谱-串联质谱法1范围本标准规定了饲料中溴吡斯的明含量测定的液相色谱-串联质谱法。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和添加剂预混合饲料中溴吡斯的明的测定。本标准检出限为1μg/kg，定量限为2μg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本义件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样GB/T20195动物饲料试样的制备3原理试样中溴吡斯的明经甲醇或乙腈超声提取，提取液氮气吹干，超纯水溶解，WCX固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱仪测定，内标法定量。4试剂除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯试剂，水为符合GB/T6682规定的一级水。4.1乙睛：色谱纯。4.2甲醇：色谱纯。4.3甲酸：色谱纯。4.4甲酸铵：色谱纯。4.5正已烷：分析纯。4.651%甲酸甲醇溶液：取1mL甲酸，用甲醇定容至100mL。4.75mmol/L甲酸铵甲酸溶液：取甲酸铵0.315g和甲酸1.0mL,用水定容至1000ml.。4.8复溶液：甲酸铵甲酸溶液（4.7)十乙腈=90+10。4.9复溶液饱和的正已烷：在正已烷中加人复溶液（4.8），直至分层，振荡后静置待用。4. 100溴吡斯的明标准品：纯度≥98.0%。4.11溴吡斯的明-ID。标准品（同位素内标物）：纯度≥98.0%。4.12溴吡斯的明标准储备液（1mg/mL）：准确称取适量溴吡斯的明标准品，用色谱纯甲醇配制成1000μg/mL的标准储备液，一20℃储藏，有效期6个月。4.13溴吡斯的明标准工作液(0.1μg/mL)：准确量取溴吡斯的明标准储备液（4.12)，用色谱纯甲醇稀释成溴吡斯的明浓度为0.1μg/mL的标准工作液，4℃储藏，有效期1个月。4.14溴吡斯的明-D（4.11)标准储备液（1mg/mL）：准确称取适量溴吡斯的明-D。标准品，用色谱纯甲醇配制成1000ug/mL的标准储备液，一20℃储藏，有效期6个月。4.15溴吡斯的明-D。标准工作液（0.1μg/mL）：准确量取溴吡斯的明-D。标准储备液（4.14），用色谱L NY/T 3142—2017纯甲醇稀释成溴吡斯的明浓度为0.1μg/ml的标准工作液，4℃储藏，有效期1个月。5仪器和设备5.1液相色谱-串联质谱联用仪：配电喷雾离子源(ESI)。5.2分析天平：感量0.1mg。5.3分析天平：感量0.01mg。5.4涡旋振荡器。5.5超声水浴。5.6离心机：最高转速12000r/min或以上。5.7氮吹仪。5.8固相萃取装置。5.9滤膜：0.22μm。5.10固相萃取小柱：混合型弱阳离子交换柱（WCX），150mg/3mL；或相当者。6试样制备按照GB/T14699.1的规定抽取有代表性的饲料样品，用四分法缩减取样，按照GB/T20195的规定制备样品，粉碎后过0.45mm孔径的分析筛，混匀，装人磨口瓶中，备用。7测定步骤7.1提取7.1.1配合饲料、浓缩饲料、精料补充料称取试样约2g（精确至0.1mg），准确加人溴吡斯的明-D标准工作液（4.15）100μl，加人甲醇（4.2)20ml，涡旋30s，超声提取10min，10000r/min离心5min，准确取上清液10ml，置于水浴锅中50℃氮气吹干，准确加水10ml溶解，加人10ml.正已烷（4.5），涡旋30s，10000r/min离心5min，准确取下层液体5ml，为样品提取液。7.1.2添加剂预混合饲料称取试样约2g（精确至0.1mg），准确加人溴吡斯的明-D。标准工作液（4.15）100μL，加入乙睛（4.1)20mL，涡旋30s，超声提取10min，10000r/min离心5min，准确取上清液10mL，置于水浴锅中50℃氮气吹干，准确加水10ml溶解，加人10m