NY_T 2888.1-2016真菌微生物农药 木霉菌 第1部分:木霉菌母药.pdf

ICS 65.100.30B 17NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 2888.1—2016真菌微生物农药木霉菌第1部分：木霉菌母药Fungal pesticides-Trichoderma spp.Part 1 : Trichoderma spp. technical concentrates(TK)2016-05-23发布2016-10-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T2888.1—2016前言NY/T2882《真菌微生物农药药木霉菌》分为2部分：-第1部分：木霉菌母药；一第2部分：木霉菌可湿性粉剂。本部分为NY/T2882的第1部分。本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本部分由农业部种植业管理司提出并归口。本部分起草单位：农业部农药检定所、上海交通大学。本部分主要起草人：袁善奎、陈捷、姜辉、周欣欣、李雅乾、师丽红、瞿唯钢、王以燕、王一喆。I NY/T2888.1—2016真菌微生物农药木霉菌第1部分：木霉菌母药1范围本部分规定了真菌微生物农药木霉菌母药的要求、试验方法、标志、标签、包装、贮运及验收。本部分适用以棘孢木霉（Trichodermaasperellum）、哈茨木霉（Trichodermaharzianum）、深绿木霉（Trichodermaatroviride）等木霉菌种为活性成分的粉状木霉菌母药。注：上述3种木霉菌菌种有效成分描述参见附录A。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T191包装储运图示标志GB/T1601农药pH值的测定方法GB/T1604商品农药验收规则GB/T1605商品农药采样方法GB3796农药包装通则GB/T8170—2008数值修约规则与极限数值的表示和判定GB/T30361农药干燥减量的测定方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1木霉菌母药Trichoderma spp.technicalconcentrate（TK）由木霉菌纯菌种经生物发酵生产而获得的高含量分生孢子或厚垣孢子粉，通常情况下还会包含伴随发酵过程的少量生物组分和化学杂质。3. 2菌落形成单位colonyformingunits(CFU)将木霉菌母药用无菌水稀释后得到的菌液通过涂布的方法，让其单个孢子分散在琼脂平板上，待培养后每个孢子形成一个特定菌落，即一个菌落形成单位（CFU），通过肉眼观察菌落的数量来推算单位微生物农药样品中的含孢量。3. 3含孢量sporecontent每克木霉菌母药中所含的孢子数量，所含孢子数量包括分生孢子和厚垣孢子。注：单位为菌落数每克（CFU/g）。3. 4杂菌率microbial contaminant木霉菌母药中除了木霉菌外，其他微生物（如真菌和细菌等)量占总菌量的百分率。1 NY/T2888.1—20164要求24.1外观经生物发酵生产而获得的高含量分生或厚垣孢子粉，一般为绿色粉状物，由于菌种或发酵基质的不1同颜色偶有差异，通常情况下还会包含伴随发酵过程的少量生物组分和化学杂质，但应为均匀疏松的粉末，不可有团块。4.2指标木霉菌母药质量控制项目指标应符合表1要求。表1木霉菌母药控制项目及指标指标项目≥20×108含孢量，CFU/g≤1. 0杂菌率，%≤12.0干燥减量，%6.0~8.0pH5试验方法5.1抽样按照GB/T1605规定进行样品的采集，用随机数表法确定抽样的包装件，最终抽样量不少于100g。采样时应特别注意避免样品污染，采样容器和工具应经过消毒灭菌，样品采集后应立即进行检验，若不能立即检验，应于4℃条件下贮存。5.2菌种鉴别采用DNA条形码的标准基因进行检测，并可辅助形态学特征进行菌种鉴别，鉴别方法参见附录B。5.3含孢量测定采用平板菌落计数法，单位为CFU/g。5.3.1试剂和溶液脱氧胆酸钠（化学纯）；a）b)马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基；c)蛋白陈营养琼脂(NA)培养基；d)无菌水：121℃蒸汽灭菌30min，冷却后备用。5.3.2主要仪器、设备a)培养皿：直径90mm，高16mm~17mm；b)分析天平：精度为0.001g；c)移液器；d)高压蒸汽灭菌器；e)超净工作台；f)恒温振荡器；恒温培养箱（控温范围0℃～50℃，控温误差士2℃）；g)h）恒温水浴锅；i）生物显微镜：X1000倍。5.3.3试验步骤样品的准备在无菌操作条件下，将样品搅拌均匀，准确称取1.00g样品，溶人100mL的无菌水中浸泡30min2 NY/T2888.1—2016后，振荡30min，得到稀释100倍的样品溶液，标记为1号。然后参照表2