NYT 1277-2007蔬菜中异菌脲残留量的测定高效液相色谱法.pdf

ICS 67.080.20B 15NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1277-2007蔬菜中异菌脲残留量的测定高效液相色谱法Determination of Iprodione Residues in Vegetables by HPLC2007-07-01实施2007-04-17 发布中华人民共和国农业部发布 NY/T 1277--2007前言本标准的附录 A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位：农业部蔬菜品质监督检验测试中心(北京）。本标准主要起草人：刘肃、靳松、林桓。 NY/T 1277--2007蔬菜中异菌脲残留量的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了用高效液相色谱测定蔬菜中异菌脲残留量的方法。本标准适用于番茄、大白菜、菜豆、结球甘蓝、黄瓜等蔬菜中异菌脲残留量的测定。本方法的检出限为0.35mg/kg。本方法的线性范围为 1 mg/L～40 mg/Lc2 原理试样中的异菌脲经乙腈浸提，弗罗里硅土柱净化后，用配有紫外检测器的高效液相色谱仪在波长218 nm处测定,根据色谱峰的保留时间定性,外标法定量。3 试剂除非另有说明,在分析中仅使用分析纯试剂和GB/T 6682中规定的一级水。3.1 丙酮。3.2正已烷。3.3丙酮正已烷溶液［(CHO+CHi4）=1+1]。3.4 丙酮—正已烷溶液［(C,H.O+CHi4)=8+2]。3.5 乙腈,重蒸。3.6甲醇,色谱纯。3.7无水硫酸钠。3.8氯化钠。3.9弗罗里硅土：0.149mm~0.250mm,130℃烘10h,加5%水减活。3.10异菌脲标准品,纯度≥95%。3.11异菌脲标准贮备液：准确称取0.0500g异菌脲标准品，用甲醇(3.6)溶解并转人50mL容量瓶，用甲醇(3.6)定容,得到1000 mg/L的标准贮备液。3.12异菌脲标准工作液:使用时由 3.11 稀释得到 100mg/L 和10 mg/L的标准工作溶液。其余标准溶液均由3.12稀释得到。４ 仪器4.1高效液相色谱仪,配紫外检测器。4.2分析天平,感量0.1mg和0.01g。4.3 均质器,6 000 r/min～36 000 r/min。4.4旋转蒸发仪。4.5²玻璃层析柱,15cm×0.8cm。1 NY/T 1277—20075试样制备将蔬菜样品取可食部分,用干净纱布轻轻擦去样本表面的附着物,将其切碎,充分混匀,用四分法取样或直接放人食品加工机中捣碎成匀浆。匀浆放人聚乙烯瓶中于－16℃～－20℃条件下保存。称取样本时，常温样本应搅拌均匀；冷冻样本应先解冻再混匀。6分析步骤6.1提取称取匀浆试样10g(精确至0.01g)于150mL烧杯中,加50mL乙腈(3.5）,在10000r/min条件均质1min,滤液经铺有滤纸的布式漏斗抽滤至装有3g～5g氯化钠(3.8)的100mL具塞量筒中，盖上塞子,剧烈震荡1min,在室温下静止1h,乙腈相和水相分层（若有乳化现象,加少量水振摇后继续分层）。取10mL乙腈提取液至 50mL圆底烧瓶中,在旋转蒸发仪上（水浴温度 45℃)浓缩至近干,待净化。6.2净化在层析柱中依次加人3cm高的无水硫酸钠(3.7),2g弗罗里硅土(3.9)和3cm高的无水硫酸钠(3.7)。用10mL丙酮一正已烷溶液(3.3)预淋柱子,弃去预淋液。先用少量丙酮一正已烷溶液(3.4)溶解6.1得到的蒸残物并转移至层析柱中,然后用60mL丙酮一正已烷溶液(3.4)依照少量多次的原则清洗圆底烧瓶并淋洗，接收全部洗脱液并在旋转蒸发仪上（水浴温度45℃）浓缩至近干，氮气吹干后用2.00mL甲醇(3.6)溶解蒸残物,过0.45μm微孔滤膜,待测。6.3色谱参考条件检测波长:218nm。色谱柱:C18不锈钢柱,250mm×4.6 mm,5μmo流动相:甲醇一水溶液[亚(CH;OH+H2O)= 70 +30]。流速:1.0 mL/mino进样体积:20μL。保留时间:23min左右。6.4测定分别将标准溶液和待测液注人高效液相色谱仪中，以保留时间定性，以待测液峰面积与标准溶液峰面积比较定量。6.5试剂空白实验除不加样本外,采用完全相同的测定步骤进行平行操作。7 结果计算试样中异菌脲的残留量用质量分数w计,单位以毫克每千克(mg/kg)表示,按公式(1)计算：w= P-XVsXAxXVex(1)XHVx× As× m式中:-试样中异菌脲残留量，单位为毫克每千克（mg/kg)；W标准溶液质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）；ps-标准溶液进样体积,单位为微升(μL)；Vs试样溶液最终定容体积，单位为毫升（mL）；Vo-Vx-—待测液进样体积,单位为微升(μL);-标准溶液的峰面积；As*2 NY/T 1277—2007Ax——待测液的峰面积;一试样质量,单位为克(g);mF一分