血液检验基本技术—血涂片制备与染色（临床检验课件）.pptx

 临床检验基础 第三讲 血涂片制备 实验原理 实验目的 实验器材 实验试剂 操作步骤 注意事项 目 录 CONTENTS 实验目的 掌握血涂片制备的操作步骤 实验原理 使用推片将血液在载玻片上制成血膜 试验器材 一次性采血针、酒精棉球、镊子、脱脂洗净的载玻片、推片 试验器材 操作步骤 器具选择 1 质量控制 3 血涂片的制备过程 （常用手工推片法） 2 器具选择 01 载玻片要求 国内1.0mm×26mm×（76±0.5）mm，制备血涂片所用的载玻片必须是洁净、干燥、中性的、无油腻。 02 推玻片要求 推片两端边缘整齐、平滑。也可选用大小、厚度与玻片相同、两端边缘光滑的有机玻璃。 03 标本要求 可用抗凝血和非抗凝血。最好用非抗凝血，但随着血细胞分析仪的普及，血标本多为EDTA抗凝血，可引起红细胞皱缩及白细胞丛集，故推制血涂片应尽早进行（最迟在1～2h内进行） 血涂片的制备过程 （常用手工推片法） 01 取血 皮肤采血法采集血标本，取一滴绿豆大小的血标本在载玻片的一端，离端点约1.5cm处。 02 推片 左手拿载玻片，右手拿推玻片放在血滴前并接触血滴，使血滴沿推片散开成一线。 03 干燥 将制备好的血膜，立即在空中挥动，使其迅速干燥，以避免血细胞皱缩变形。 04 标记 涂片干燥后用铅笔在血涂片的头部写上姓名和编号 质量控制 一张良好的血涂片要求血膜外观厚薄适宜，头、体、尾分明，细胞分布均匀，边缘整齐，两侧留有空隙。 血涂片制备 推片 载玻片 血液 将推片匀速向前，勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度：快、大(厚)。慢、小（薄） 一张满意的血涂片应厚薄均匀 头 体 尾鲜明 涂片干燥后用铅笔在血涂片的头 部写上姓名和编号 李四 B 1 2 3 注意事项（一） 玻片 1 载玻片应洁净、干燥、中性、无油腻。 推片 2 推片时速度要一致，否则血膜成波浪形，厚薄不匀，初学者可把玻片放在桌上操作。 注意事项（二） 推片后 3 推好的血涂片应立即在空气中挥动使其尽快干燥，天气寒冷或潮湿时，应将涂片置于37℃恒温箱中保温促干，以免细胞变性缩小。 时间要求 4 血涂片应在1h之内染色或在1h之内用无水甲醇（含水量3%)固定后染色。 请认真书写实验报告  临床检验基础 第四讲 血涂片染色 实验原理 实验目的 实验器材 实验试剂 操作步骤 注意事项 目 录 CONTENTS 实验目的 掌握血涂片瑞氏染色的原理和操作步骤，熟悉瑞氏染液的组成和配制 实验原理 细胞的染色既有物理吸附作用，又有化学的亲和作用，各种血细胞及细胞的不同成分对酸性染料和碱性染料的亲和力不同，因而经瑞氏染液染色后各种血细胞呈现各自的染色特征。 试验器材、试剂 载玻片、吸耳球、染色架、显微镜 实验器材 试剂 Wright’s染液 pH6.8磷酸盐缓冲液 操作步骤（一） 01 制片 血涂片制备 02 标记 待血涂片干透后，用蜡笔在血膜的两端划线并编号。 03 染色 加瑞氏染液3~5滴，覆盖整个血膜，固定细胞约0.5～1min。滴加等量或稍多的缓冲液，用洗耳球对准涂片吹气，使染液充分混匀。 操作步骤（二） 05 镜检 血膜外观呈紫红色。显微镜下，红细胞呈粉红色，细胞核呈紫红色，嗜酸性颗粒呈橘红色，嗜碱性颗粒呈紫黑色。 04 冲洗 室温染色5～10min后，用清水在玻片无血膜处冲去染液，待干燥后镜检 注意事项（一） 1 未干透的血膜不能立即染色，否则血膜容易脱落。 2 染色时间的长短与染液浓度、室温高低呈反比，而与有核细胞的数量呈正比。 3 染液不能太少，以防蒸发沉淀。 4 冲洗时不能先倒掉染液，应以细水流缓缓冲去，以防染料沉着在血膜上。 请认真书写实验报告