NY_T 2186.5-2012微生物农药毒理学试验准则第5部分：亚慢性毒性/致病性试验.pdf

ICS 65.020.01B 17NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 2186.5—2012微生物农药毒理学试验准则第5部分：亚慢性毒性/致病性试验Microbial pesticide toxicological test guidelines-Part 5 : Subchronic toxicity/pathogenicity study2012-06-06发布2012-09-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T 2186.5—2012前言NY/T2186《微生物农药毒理学试验准则》分为以下几部分：一第1部分：急性经口毒性/致病性试验；一第2部分：急性经呼吸道毒性/致病性试验；一第3部分：急性注射毒性/致病性试验；—第4部分：细胞培养试验；一第5部分：亚慢性毒性/致病性试验；一第6部分：繁殖/生育影响试验。本部分为《微生物农药毒理学试验准则》的第5部分。本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本部分由中华人民共和国农业部种植业管理司提出并归口。本部分起草单位：农业部农药检定所。本部分主要起草人：张丽英、陶传江、李敏、孟宇晰、闫艺舟、叶纪明Y NY/T 2186.5—2012微生物农药毒理学试验准则第5部分：亚慢性毒性/致病性试验1范围本部分规定了亚慢性毒性/致病性试验的基本原则、方法和要求。本部分适用于为微生物农药登记而进行的亚慢性毒性/致病性试验。2试验目的亚慢性毒性/致病性试验提供暴露于微生物农药（90d)可能引起的健康危害信息。3试验概述实验动物每天给予一定剂量的微生物农药，至少持续90d。在此期间，每日观察动物的毒性和致病性体征，试验期间死亡和试验结束时处死的动物进行大体解剖检查，并定量检测组织、器官和体液中微生物农药的量。4受试物一般情况下，受试微生物农药的形态应与用于急性毒性/致病性试验的形态相同，该形态会导致显著的感染性或异常的持久性，但不伴有致病性或毒性。5试验步骤5.1动物选择5.1.1种属和品系实验动物的种属和品系应与急性毒性/致病性试验中，观察到受试微生物农药的感染性或持久性，但不伴有明显致病性或毒性体征的动物一致。实验动物应不携带特定微生物或寄生虫。5.1.2年龄和性别使用初成年动物。雌雄两种性别，每种性别的动物数相同。雌性动物应是未孕和未经产的。实验动物体重差异不超过同性别动物平均体重的土20%。5.1.3数量试验组至少20只动物（雌雄各10只）。此外，还需要一定数量的动物用于设立对照组。5.2对照组5.2.1需要设一个平行的未经处理的对照组。5.2.2一般不需要设单独的溶剂或介质对照组，除非溶剂或介质的毒性未知。5.2.3必要时，设立给予灭活受试物(如丧失繁殖、发育或脱孢囊能力)的对照组，可有助于评价受试物的毒性。采取的灭活方式应能保持微生物结构的完整性。5.3给药5.3.1给药剂量试验组动物给药剂量至少为1.0×10°单位/只。如果剂量达不到1.0×108单位/只，应说明理由。5.3.2溶剂或介质1 NY/T2186.5—2012原药所用溶剂或介质应能保持微生物的活性、发育能力或脱孢囊能力，或对适宜宿主的胞内寄生和感染能力。推荐用于其他剂型的溶剂或介质宜与施药时分散、混合、悬浮或稀释所用物质相同。5.3.3给药途径给药途径应与急性试验阶段，观察到显著感染性或异常持久性，但没有致病性或毒性试验的给药途径一致。5.3.4给药周期每天给药一次，至少持续90d。5.4动物观察5.4.1每天对所有实验动物至少进行一次仔细的临床观察。每天还应进行必要的额外观察，并采取适当措施，如：死亡动物的解部检查和体内受试物的定量检测，虚弱或濒死动物的隔离检查等，以尽可能减少试验中动物信息的丢失。5.4.2笼旁观察应该包括，但不限于以下变化：a）皮肤和被毛；b)眼睛和黏膜；c)呼吸系统；d)循环系统；e)自主神经和中枢神经系统；f）身体活动性；g）行为方式。应特别注意观察震颤、抽搐、腹泻、无力、流涎、睡眠和昏迷等体征。5.4.3试验开始前、试验开始后每周、死亡或处死时称量每只动物的体重。试验期间每周记录动物的摄食量和饮水量。尽量准确记录动物的死亡时间。5.5病理学检查所有实验动物在死亡或处死时，都要进行大体病理学检查，并记录观察到的所有变化。如大体病理学检查有明显改变，应进行组织病理学检查，或分离、检测损伤部位的受试微生物。5.6组织、器官和体液中受试物的定量检测5.6.1定量检测技术采用敏感的定量技术对试验中死亡和试验结束时处死的实验动物的组织、器官和体液中的受试物进行检测。同时，应测定并报告每种方法的回收率、检测限和灵敏度。5.6.2定量检测范围定量检测范围包括实验动物的肾、脑、肝、肺、脾、血液和代表性淋巴结。根据观察到的毒性和致病性作用，还可能需要进行其他组织、器官和体液的检测。6试验数据和报