第一章细胞的分离与胞内.pptVIP

离心设备的选择 基本参数 选择 颗粒d,固液?差,? 基本型号 固体物浓度 亚型 产物热稳定性 低温离心 流量Q, 规模 规格、台数 活cell 密封灭菌设计 当前第30页\共有82页\编于星期三\8点 三、过滤 定义：利用薄片形多孔性介质（如滤纸）截留固液悬浮液中的固体粒子，进行固液分离的方法称为过滤（filtration）。 过滤介质： 1）无定形颗粒：颗粒活性炭、沙、无烟煤 2）成形颗粒：烧结金属、烧结塑料 3）非金属织物：尼龙、玻璃纤维 4）金属织物：不锈钢丝网 5）无纺品：纸、石棉 当前第31页\共有82页\编于星期三\8点 （一）过滤基础理论 过滤时滤液的透过速度： dQ A△p dt μL(Rm+Rc) 式一 式中： Q为滤液体积，m3； A为过滤面积，m2； △p为操作压力，pa； μL为滤液的粘度，pa×s； Rm和Rc分别为介质和滤饼的阻力，m-1 = 当前第32页\共有82页\编于星期三\8点 滤饼阻力Rc与滤饼干重W（kg）之间有如下关系： Rc＝αW/A 式二 式中：α为滤饼的平均比阻，m/kg。 1）不可压缩性滤饼（如坚硬的乳胶粒子）α为常数 2）可压缩性滤饼（如菌体、细胞 ）α＝k△pm； 其中：m为压缩指数，一般在0.3－1.2之间； 对于一定的料液，k为常数。 由此可知，可压缩滤饼的比阻值α随压力提高而增大。在过滤操作中，一般需缓慢增大操作压力，最终压力不能超过0.3－0.4MPa 当前第33页\共有82页\编于星期三\8点 随着过滤操作的进行，滤饼干重w不断增加，与滤液体积Q之间有如下关系： w＝ρLQcs/(1-βcs) 式三 式中：ρL为滤液密度； cs为料液中形成滤饼的固形成分含量； β为湿滤饼和干滤饼的质量比 将式三代入式二，得到Rc的表达式： 同时Rm用相同形式表达： 式中：Q0为形成相当于过滤介质阻力的滤饼时透过的虚拟滤液体积，特定过滤介质的Q0值为常数 当前第34页\共有82页\编于星期三\8点 最后把Rc、Rm代入式一，得过滤基本方程： 式四 当前第35页\共有82页\编于星期三\8点 Ruth恒压过滤方程 恒压操作条件下积分式四，得Ruth恒压过滤方程：（Q＋Q0）2＝K（t＋t0） 式五 其中 K称为Ruth恒压过滤系数 t0为透过虚拟滤液量Q0所需的虚拟时间 微分式五可得： 当前第36页\共有82页\编于星期三\8点 恒速过滤 恒压过滤操作中滤饼阻力不断上升，过滤速度不断下降。 采用往复式恒流泵可进行恒速过滤，其间操作压力不断上升。 当前第37页\共有82页\编于星期三\8点 （二）悬浮液的预处理 提高过滤速度和过滤质量是过滤操作的目标。 由于滤饼阻力是影响过滤速度的主要因素，因此在过滤操作前，一般要对滤液进行预处理，改变料液的物理性质（黏度、颗粒?、颗粒稳定性等），降低滤饼的阻力，固液分离速度?，分离器分离效率? 。 当前第38页\共有82页\编于星期三\8点 预处理方法 加热：最简单和最廉价的处理方法。黏度? 、促凝聚、固体成分体积? 、破坏凝胶结构、增加空隙率 调pH值：方法简单有效、成本低廉 凝聚：在凝聚剂(如铝盐、铁盐、石灰和NaCl)作用下，细胞蛋白质等胶体去稳定，并聚集成1mm大小的凝聚块的过程。 机理：破坏双电层，水解后胶体吸附，氢键结合等。 当前第39页\共有82页\编于星期三\8点 絮凝：在絮凝剂高分子聚合电解质的作用下，胶体颗粒和聚合电解质交连成网，形成10mm大小的絮凝团过程。 絮凝剂：如聚丙烯酰胺、聚二烯丙基四胺、环氧化乙烯。 机理：絮凝剂主要起中和电荷、桥架和网络作用 惰性助滤剂：一种颗粒均匀、质地坚硬的粒状物质，用于扩大过滤表面的适应范围，减轻细小颗粒的快速挤压变形和过滤介质的堵塞。