QPCR实验记录书写模板.docVIP

PCR实验记录书写模板（示例） 一、细胞铺板分组及干预处理 （1）试剂耗材准备：培养好的巨噬细胞、药物干预（品牌：MCE公司）、脂多糖LPS（品牌：Solarbio）、IFN- （品牌：proteintech）、细胞培养板等 （2）PIMs分为以下3个实验组： 组别 处理方式 Con组 空白对照，等容量DMSO LPS+IFN- 组 IFN- (10ng/mL)和LPS（1ug/ml）处理48小时 药物干预组 药物干预(300nM)处理48小时 （3）处理结束后每孔加入1ml PBS洗两次，最后弃PBS，加入1ml Trizol，混匀，室温静置5min。每孔加入1ml的Trizol裂解液裂解细胞，最后转移至1.5mlEP管中，继续实验或放低温负80冰箱保存。 二、Trizol法提取RNA Trizol是一种新型总RNA抽提试剂，采用变性剂即内含异硫氰酸胍酚和β-巯基乙醇等变性物质，能迅速破碎细胞，抑制细胞释放出的核酸酶。异硫氰酸胍属于解偶剂，是一类强力的蛋白质变性剂，可溶解蛋白质，并使蛋白质二级结构消失，细胞结构降解，核蛋白迅速与核酸分离。β-巯基乙醇主要破坏RNase蛋白质中的二硫键。 （1）试剂准备:Trizol试剂、氯仿、异丙醇、75%乙醇（DEPC水配制）、DEPC水、1.5ml EP管等。 （2）操作步骤 1．样品处理：从负80冰箱中取出裂解充分的样本，至冰上融化。 2．