SN 1383-2004苹果实蝇检疫鉴定方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1383—2004苹果实蝇检疫鉴定方法Methods for quarantine and identification of apple maggot[Rhagoletis pomonella (Walsh)]2004-06-01发布2004-12-01实施中华人民共和国01发布数码防伪，国家质量监督检验检疫总局 1SN/T 1383—2004前言本标准的附录 C 为规范性附录,附录 A、附录 B和附录 D 为资料性附录。本标准由国家认证认可监督委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国广东出人境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人：吴佳教、梁广勤、杨国海、梁帆、胡学难、张志红。本标准系首次发布的检验检疫行业标准。···/.--- --.SN/T 1383—2004:苹果实蝇检疫鉴定方法1范围本标准规定了苹果实蝇的检疫和鉴定方法。-.本标适用于进口苹果实蝇寄主植物(参见附录A)及其果实时对苹果实蝇的检疫和鉴定。2原理苹果实蝇Rhagoletis pomonella（Walsh），属双翅目（Diptera），实蝇科（Tephritidae）、实蝇亚科（Trypetinae）、绕实蝇属（Rhagoletis），主要以幼虫随被害果实作远距离传播，有时围蛹也可随果实的包装物或寄主植物所附土壤传播。苹果实蝇的形态特征、寄主植物、传播途径及生物学特性为制定检疫鉴定方法提供了依据。3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3. 1额额frons头部前面,两侧以复眼为界并介于单眼三角区(在头部背缘)与触角之间的区域。3.2.-上额胆 superior fronto-orbital bristles位于额区靠头顶的一对或二对鬃的统称。3.3下额眶攀inferior fronto-orbital bristles 位于额区上额眶鬃之下的数对鬃的统称。·3. 41后头 occiput头部的整个后面。13.5后头鬃列occipital rows在后头沿每个复眼后缘的一列鬃毛。3.6顶景 vertical bristles位于头顶、两复眼之间，单眼三角区周围的二对鬃(分别称内顶鬃和外顶鬃)的统称。3.7颊 genae头部侧面，复眼以下伸展至外咽缝的区域。3.8肩朋 humeral calli中胸盾片的前侧方略为隆出的区域。1. SN/T 1383-20043.9背侧板胛 notopleural calli位于肩胛与翅基之间的背侧板上三角形隆起。3. 10中胸背板缝mesonotal suture中胸背板上由背侧板胛内缘至中胸背板中央的一条凹线。3.11肩板 scapular bristles位于中胸背板前缘的鬃的统称。注：实蝇分类学常见术语图示，参见附录 B。4仪器、用具和试剂4.1仪器与用具体视显微镜、干燥箱、冰箱、温湿度计、量筒（50mL、500mL）、烧杯数个（大号、小号）、培养皿、小型干燥器、指形管、剪刀、解剖刀、解剖针、昆虫针（00号、四号）、载玻片、盖玻片、标签纸、三级台、三角纸、酒精灯、玻璃棉、养虫杯、养虫箱、防虫网罩（用40目纱网做衬底）、白瓷盘（大号、小号）。4.2试剂10%氢氧化钠(或10%氢氧化钾)溶液、封片胶、苯酚、二甲苯、75%乙醇、丙三醇、水合三氯乙醛、阿拉伯树胶粉、蒸馏水。4.3试剂的配制4.3.110%氢氧化钠(或10%氢氧化钾)溶液的配制称取氢氧化钠（或氢氧化钾)10g，加人100mL蒸馏水，溶解后即可。4.3.2封片胶的配制称取阿拉伯树胶粉30g于烧杯中，加人50mL蒸馏水（最好是温水以加速溶解）。溶解后，加人200 mL水合三氯乙醛及 20 mL丙三醇,置于 55℃～60℃的干燥箱内。一天后，用玻璃棉过滤(过滤时仍置于55℃～60℃的干燥箱内进行）。4.3.3保存液的配制量取75%乙醇100 mL，加人1 mL丙三醇。5 实验室鉴定5.1鉴定前的培养方法5.1.1卵或幼虫的培养将现场采取的卵和幼虫部分个体制成鉴定标本，其余个体继续用原寄主果实培养。具体的培养方法是：将带有卵或幼虫的寄主果实放在小号白瓷盘里，然后将小号白瓷盘放在装有自来水的大号白瓷盘内，再用防虫网罩盖住小号白瓷盘，罩的下方边缘浸没于大号白瓷盘内的水中，置于温度为22℃～28℃,湿度为 50%～90%的环境中培养5 d～10 d。在样品培养过程中,感染在果实中的卵或幼虫发育至老熟幼虫时将会弹跳人大号白瓷盘的水中，易于发现。5.1.2围蛹的培养取一盛有半于湿(含水量约5%)洁净细砂的养虫杯,将现场检疫收集的或室内培养得到的闺蛹埋入距细砂表面3cm～5 cm 处(若是老熟幼虫则可直接将其置于细砂表面,幼虫将钻人砂中化蛹），然后置于养虫箱中培养,待成虫羽化。培养环境温度为22℃～28℃，湿度为50%～90%，