赤雹根总皂苷对佐剂性关节炎大鼠足跖部炎症反应的治疗作用.docxVIP

赤雹根总皂苷对佐剂性关节炎大鼠足跖部炎症反应的治疗作用 满族药之锤是辽宁省植物之锤（tb）的干燥根系。主要分布在中国北方、东北地区、内蒙古等地。它资源丰富，对满族人民来说是迄今为止的一种药物。赤雹根味苦、性寒, 可治疗乳汁不下、乳房胀痛以及多种慢性疼痛, 如跌打损伤、肌肉痛、类风湿性关节炎等, 且无明显的毒副作用, 具有重要的开发利用价值 1 材料和方法 1.1 藤多苷片、安徽新陇海组 TSTDR, 承德医学院中药研究所制备;雷公藤多苷片, 安徽新陇海药业有限公司, 批号:100301;弗氏完全佐剂 (FCA) , 美国Sigma公司, 批号:100M8725。 1.2 tstdr大鼠模型建立 健康雄性8周龄SD大鼠60只, 体重180-200g, 购自北京华阜康生物科技股份有限公司, 合格证号:SCXK京2009-0007。大鼠随机分为正常对照组, 模型组, TSTDR低、中、高剂量组和雷公藤多苷组, 每组10只大鼠。除正常对照组大鼠外, 其余各组大鼠均于右后足跖部皮下注射FCA 0.1ml, 以注射点周围出现明显白泡为佳, 以造模后第18d大鼠关节炎指数AI值≥6为模型建立成功。 于造模后第18d开始, TSTDR各剂量组大鼠分别灌胃给予不同剂量的TSTDR (160、80、40mg/kg/d) ;雷公藤多苷组大鼠灌胃给予雷公藤多苷 (12mg/kg/d) ;正常组和模型组大鼠分别灌胃给予相应体积的蒸馏水;各组大鼠每天给药1次, 连续给药21d。 1.3 小外合节损伤2级 0级, 无红肿, 0分;1级, 跖关节稍肿, 1分;2级, 小趾关节及足跖关节肿胀, 2分;3级, 踝关节以下足爪肿胀, 3分;4级, 包括踝关节在内的全部关节肿胀, 4分。AI值=非致炎3只肢体关节肿胀级别之和 (最高分为12分) 。 1.4 检测大鼠左后足水肿度 于给药前 (致炎后18d) 以及给药后第5d开始, 每隔4d用游标卡尺测量大鼠左后足踝部直径, 并计算足肿胀度:足肿胀度 (%) =[测量时踝部直径值 (cm) -造模前踝部直径值 (cm) ]/造模前踝部直径值 (cm) 。 1.5 组织病理学观察 给药结束后处死大鼠, 剪取足跖部炎症组织, 10%甲醛固定液固定48h, 常规石蜡包埋、切片, HE染色, 10×20倍光镜下观察病理变化。 1.6 统计处理 采用SPSS 17.0统计软件进行统计分析, 组间比较行方差分析, P0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 tstdr对大鼠足水肿度的影响 与模型组相比, TSTDR高、中、低剂量组大鼠足肿胀度分别于给药后第5d、9d、13d时明显下降 (P0.01) ;同时间点TSTDR各剂量组大鼠足肿胀度比较, 差异无统计学意义;给药后第21d TSTDR高剂量组大鼠足肿胀度明显低于雷公藤多苷组 (P0.05) 。见附表。 2.2 tstdr和雷公藤多苷对大鼠足跖部炎症细胞浸渍 正常对照组大鼠足跖部为完整的肌肉组织, 无炎症浸润及血管增生 (附图A) 。模型组大鼠足跖部肌肉组织坏死, 有大量炎性细胞浸润, 出现较多毛细血管增生, 成纤维细胞大量生成 (附图B) 。与模型组比较, TSTDR 80mg/kg/d组和雷公藤多苷组大鼠足跖部炎症细胞浸润水平明显降低, 但仍可见大量成纤维细胞 (附图C) ;TSTDR 160mg/kg/d组大鼠足跖部炎性细胞浸润水平与成纤维细胞数明显降低, 血管增生明显减少, 可见新生的肌肉组织 (附图D) 。 3 tstdr的临床治疗作用 类风湿性关节炎 (rheumatoid arthritis, RA) 是以多发性和对称性增生性滑膜炎为主要表现的慢性全身性自身免疫性疾病。由于炎症加剧和缓解反复交替进行, 引起关节软骨和关节囊的破坏, 最终导致关节强直畸形 本研究发现, TSTDR可明显降低AA模型大鼠足肿胀度, 表现出良好的抗炎效果, TSTDR 160、80、40mg/kg/d剂量组分别于给药第5d、9d和13d显示出治疗作用。本研究提示, 虽然不同剂量的TSTDR表现出相同的治疗作用, 但大剂量可更早达到治疗效果。足跖部病理切片显示, 中剂量 (80mg/kg/d) 的TSTDR对于炎性细胞浸润这一炎症的早期反应即有一定的抑制作用, 而对毛细血管增生、组织纤维化等无明显抑制作用;而高剂量 (160mg/kg/d) 的TSTDR不仅能降低炎性细胞浸润水平, 还能减少毛细血管增生和组织纤维化。本研究结果表明, 各剂量TSTDR均有降低AA模型大鼠足肿胀度、抑制足跖部炎症反应的作用, 并且, 高剂量TSTDR的抗炎作用优于阳性对照药雷公藤多苷, 因此TSTDR可作为良好的抗RA药物加以研究。