SN 1496-2004化妆品中生育酚及α-生育酚醋酸酯的检测方法 高效液相色谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1496—2004化妆品中生育酚及α-生育酚乙酸酯的检测方法‧高效液相色谱法Determination of tocopherol and a-tocopheryl acetate in cosmetics-High performance liquid chromatography2005-04-01实施2004-11-17 发布中华人民共和国数码防伤发布国家质量监督检验检疫总局 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准化妆品中生育酚及 α-生育酚乙酸酯的检测方法高效液相色谱法SN/T 1496—2004*中国标推出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045网址 www. bzcbs. com电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本880×12301/16印张 0.5字数 ８千字2005年2月第一版2005年2月第一次印刷* SN/T 1496--2004前言本标准的附录 A为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中国检验检疫科学研究院负责起草。本标准主要起草人：李翔、王星、丁岩、蔡天培、王超。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 1496-—2004化妆品中生育酚及α-生育酚乙酸酯的检测方法高效液相色谱法1范围本标准规定了化妆品中生育酚总量及α-生育酚乙酸酯含量的液相色谱测定方法。本标准适用于化妆品中生育酚总量及α-生育酚乙酸酯含量的检验。2原理用乙醇、乙醚和正已烷的混合溶剂提取化妆品中α-生育酚、β-生育酚、-生育酚、-生育酚及α-生育酚乙酸酯，离心，取上清液，以邻苯二甲酸二正辛酯作为内标，用带紫外检测器高效液相色谱测定，根据其保留时间定性，内标法定量。3试剂和材料除另有规定外，试剂均为分析纯。3.1甲醇，优级纯，用0.45μm滤膜过滤。3.2 正己烷。3.3 乙醇。3.4 乙醚。3.5 α-生育酚,纯度 96.9%。3.6β-生育酚，纯度 96.9%。3.7-生育酚,纯度 99.5%。3.8-生育酚,纯度 92.4%。3.9α-生育酚乙酸酯，纯度 99.2%。3.10邻苯二甲酸二正辛酯,纯度 99.0%。3.11生育酚及α-生育酚乙酸酯标准储备液：分别称取适量(精确到 0.1 mg)α-生育酚、β-生育酚、-生育酚、-生育酚，α-生育酚乙酸酯,邻苯二甲酸二正辛酯，用正已烷定容至100 mL,摇匀，配制成各物质浓度为0.5mg/mL的混合标准储备液，4℃保存。3.12 邻苯二甲酸二正辛酯内标储备液：称取适量邻苯二甲酸二正辛酯(精确至0.1 mg)于 100 mL容量瓶中，加正已烷至刻度，摇匀，配制成浓度为3.3mg/mL的溶液，4℃保存。3.13邻苯二甲酸二正辛酯内标液：取内标储备液（3.12)5mL于100ml容量瓶中，正己烷稀释至刻度，摇匀（此溶液保存期1d)。4仪器和设备4.1高效液相色谱仪：配紫外检测器。4.2振荡器。4.3 离心机。4.4锥形瓶:具磨口塞,50 mL。4.5容量瓶:50 mL、100 mL。1 SN/T 1496—20045测定步骤5.1 提取称取混合均匀的试样约 0.45 g(精确到 0.1 mg)于50 mL锥形瓶中,分别加入 3 mL 邻苯二甲酸二正辛酯内标液（3.13），3mL乙醇和3mL乙醚，振荡至样品均匀溶解。离心，取上清液供液相色谱测定。5.2生育酚及 α-生育酚乙酸酯标准溶液的制备准确吸取生育酚及α-生育酚乙酸酯标准储备液1 mL(3.11）,再加人2mL正已烷,3mL乙醇，3mL乙醚，摇匀，供液相色谱仪分析。5.3测定5.3.1色谱条件色谱柱：C1s不锈钢柱250 mm×4.6mm(内径）,填料为 ODS,粒径为5 μm。流动相：甲醇。流速:1.5mL/min。检测波长:280 nm。5.3. 1.5柱温：室温。进样量：10 μL。5.3.2标准的色谱测定用微量进样器准确吸取标准工作溶液(5.2)10μL注人液相色谱仪。按照色谱条件(5.3.1)进行测定,标准色谱图参见附录 A。5.3.3样品的测定用微量进样器准确吸取样品溶液(5.1)10μL注人液相色谱仪。按照色谱条件（5.3.1)进行测定，记录色谱峰的保留时间和峰面积。以其保留时间定性，峰面积定量。6 结果计算结果按式(1)、式(2)计算：As.- Ws.f: =(1)Asi.W.式中：fi-生育酚、α-生育酚乙酸酯相对内标的相对校正因子;As.-1:一标准溶液中内标的峰面积;Ws—标准溶液中生育酚、α-生育酚乙酸酯的质量,单位为克(g);Asi-生育酚、α-生育酚乙酸酯的峰面积；W..--一标准溶液中内标的质量，单位为克(g)。W, A.X: = f: X 100(2)W.A