SN_T 4448-2016皮革材料中异噻唑啉酮防霉剂的含量测定.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4448—2016皮革材料中异噻唑啉酮防霉剂的含量测定Determination of isothiazolinone fungicides content in leather material2016-03-09 发布2016-10-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局套真伪 SN/T 4448--2016前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国福建出人境检验检疫局、中华人民共和国四川出人境检验检疫局。本标准主要起草人：毛树禄、张元金、陈斌、俞凌云、尹洪雷、连小彬、李小娅1 SN/T 4448—2016皮革材料中异噻唑嘛酮防霉剂的含量测定1范围本标准规定了皮革中 2-甲基异噻唑啉-3-酮（MI）、5-氯-2-甲基异噻唑啉-3-酮（CMI)和 1,2-苯并异噻唑-3-酮(BI)等三种异噻唑啉酮的 HPLC-DAD测定方法。本标准适用于皮革及其制品中 2-甲基异噻唑啉-3-酮（MI）、5-氯-2-甲基异噻唑啉-3-酮（CM1）和1,2-苯并异噻唑-3-酮(BI)等三种异噻唑啉酮含量的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（ISO3696）3原理以甲醇为溶剂,超声萃取皮革试样中的异噻唑啉酮，提取液用HPLC-DAD测定和确证，外标法定量。4　试剂和材料试验用水应符合GB/T 6682中规定的二级水要求。4.1甲醇,色谱级。4.22-甲基异噻唑啉-3-酮（CAS号：2682-20-4），标准物质，纯度98.2%以上。4.35-氯-2-甲基异噻唑啉-3-酮（CAS号：26172-55-4），标准物质，纯度99.0%以上。4.41,2-苯并异噻唑-3-酮(CAS号：2634-33-4），标准物质，纯度99.5%以上。4.52-甲基异噻唑啉-3-酮标准储备溶液：准确称取适量的标准物质（4.2），用甲醇溶解后，定容，质量浓度为 1 000 μg/mL。4.65-氯-2-甲基异噻唑啉-3-酮标准储备溶液：准确称取适量的标准物质（4.3），用甲醇溶解后，定齐，质量浓度为 1 000 μg/mL。4.72-甲基异噻唑啉-3-酮标准储备溶液：准确称取适量的标准物质（4.4），用甲醇溶解后，定容，质量浓度为 1 000 μg/mL。4.8异噻唑啉酮混合标准工作溶液：分别移取一定体积的3种异噻唑啉酮的标准储备溶液（4.5～4.7），置于棕色容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇勾，配成0.5 ug/mL～10 μg/mL的标准工作溶液。5仪器和设备5.1管状硬质玻璃提取器，60 mL，带旋盖，配聚四氟乙烯垫片。1 SN/T 4448--20165.2氵液相色谱仪，配有二极管阵列检测器（HPLC-DAD）。5.32分析天平，感量为 0.1 mg。5.4走超声波清洗器，工作频率40kHz，超声功率500W。5.5不有机滤膜,孔径0.45um。6试样制备取有代表性试样,剪成约 4 mm×4 mm 的小片，混合均匀。7 分析步骤7.1　样品提取称取剪碎的试样1.0g(精确至0.1mg)置于玻璃提取器(5.1)中，加入10mL甲醇，旋盖，室温下将提取器置于超声波清洗器（5.4)中提取30min，滤膜（5.5)过滤，滤液待用。7.2HPLC-DAD 分析条件由于测试结果与使用的仪器和条件有关，因此不可能给出色谱分析的普遍参数。采用下列参数已被证明对测试是合适的：色谱柱:ZORBAX Eclipse XDB C18，4.6 mmX250 mmX5 μm,或相当者;a）b）柱温:40℃;c)检测波长:200 nm～400 nm;d)定量波长:275 nm,318 nm;e)流动相A（甲醇）：流动相B(水)为35：65；：f)流速:0.8 mL/min;g)进样量：15 μL。7.3HPLC-DAD 测定分别取15 μL试样和标准工作液进行 HPLC-DAD分析，通过比较试样和标准溶液在规定的检测波长处色谱峰的保留时间（参见附录A）以及紫外可见光谱图（参见附录B)进行定性，以外标法定量。同时进行空白试验。8结果计算8.1线性校准方程的建立根据异噻唑啉酮标准工作溶液及相应色谱峰面积，通过最小二乘法拟合得到线性校准方程式（1），其线性相关系数²应大于0.995。c; -K; XA;+b;(1)式中:提取液中异噻唑啉酮的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）;CiK,异噻唑啉酮校准曲线斜率；A; -提取液中异噻唑啉酮的色谱响应面积;b;异噻唑啉酮标准曲线