NYT 1331-2007乳与乳制品中 嗜冷菌、需氧芽孢及嗜热需氧芽孢数的测定.pdf

ICS 67.100.10X 16NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1331--2007乳与乳制品中嗜冷菌、需氧芽孢及嗜热需氧芽孢数的测定Enumeration of Colony of Psychrotrophic Microorganisms,Total Aerobic Bacterial Spores and Thermophilic AerobicBacterial Spores in Milk and Dairy Products(IS06730:1992 Milk-Enumeration of colony-forming units of psychrotrophic micro-organisms-colony- count technique at 6.5℃ ; NEN6813:1999 Milk and milk products-Determination of the content of spores of mesophilic aerobic sporeforming bacteria:;NEN6809:1999 Milk and milk products-Determination of the co-ntent of thermophilic aerobic sporeforming bacteria,NEQ)2007-07-01实施2007-04-17 发布中华人民共和国农业部发布 NY/T 1331—2007前言本标准的起草参考了ISO6730:1992《乳一嗜冷微生物菌落计数6.5℃菌落计数技术》（英文版);荷兰国家标准NEN6813:1999《乳与乳制品一嗜中温需氧芽孢数的测定》（荷兰文版）;荷兰国家标准NEN6809:1999《乳与乳制品一嗜热需氧芽孢数的测定》（荷兰文版）。本标准与ISO6730：1992、NEN6813:1999、NEN6809:1999的一致性程度为非等效。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国畜牧业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：农业部乳品质量监督检验测试中心。本标准主要起草人：李奇英、马文宏、张华、王金华。1 NY/T 1331—2007乳与乳制品中嗜冷菌、需氧芽孢及嗜热需氧芽孢数的测定第一部分：乳中嗜冷菌数测定1范围本部分规定了乳中嗜冷菌数的测定方法。本部分适用于生鲜乳及巴氏杀菌乳中嗜冷菌数的测定。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本部分。GB/T 4789.1食品卫生微生物学检验　总则GB/T 4789.28--2003食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3术语和定义下列术语和定义适用于本部分。3.1嗜冷菌 psychrotrophic microorganisms指在 6.5℃条件下,需氧培养 10 d,在 MPC琼脂平板上形成可计数菌落的细菌、酵母和霉菌。3.2MPC 琼脂 milk plate count agar乳平板计数琼脂。4　原理检样在 MPC琼脂内,于6.5℃条件下培养 10 d,菌落计数,算出每毫升检样中的嗜冷菌数。5稀释液和培养基5.1蛋白陈-盐溶液5.1.1成分酶水解酪蛋白陈1.0g8.5g氯化钠蒸馏水1 000 mL5.1.2制法将酶水解酪蛋白陈和氯化钠溶解于蒸馏水中，用质量分数15%氢氧化钠溶液校正pH至7.0土0.1。分装试管和烧瓶,每管 9mL、每瓶90mL或 225mL,相对误差不超过±2%。密封后,121℃ ±1℃高压灭菌15min。5.2磷酸盐缓冲液：按GB/T4789.28—2003中3.22规定进行制备。5.3 MPC 琼脂培养基1 NY/T 1331—20075.3.1成分5.0g胰蛋白陈酵母浸膏2.5g葡萄糖1.0g脱脂奶粉1.0 g琼脂10 g~15 g蒸馏水1 000 mL注1：脱脂奶粉不应含有抗生素类物质。注2:琼脂用量根据其凝固程度决定。5.3.2制法将5.3.1中除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水中，用质量分数15%氢氧化钠溶液校正pH至7.0±0.1。加人琼脂,加热煮沸，使琼脂溶化。必要时使用两层纱布之间夹脱脂棉过滤,分装烧瓶。密封后，121℃ ±1℃高压灭菌 15min。若立即使用此培养基,在水浴(6.3)中将其冷却到 45℃;否则,将灭菌后的培养基放于暗处温度为0℃～5℃之间贮存,时间不超过30 d。为了避免延误倾注培养基的时间,微生物检测之前,加热融化培养基。然后,于水浴(6.3)中冷却到45℃。6设备和材料6.1↑微生物实验室常用设备和材料。6.2