NYT 1722-2009蔬菜中敌菌灵残留量的测定 高效液相色谱法.pdf

ICS 65.100.01G 23NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1722—2009蔬菜中敌菌灵残留量的测定高效液相色谱法Determination of anilazine residue in vegetables by HPLC2009-05-20实施2009-04-23发布中华人民共和国农业部发布 NY/T 1722—2009前言本标准由中华人民共和国农业部种植业管理司提出。本标准由全国蔬菜标准化技术委员会归口。本标准起草单位：农业部蔬菜品质监督检验测试中心（北京）。本标准主要起草人：赵文、靳松、刘肃、林桓。I NY/T1722—2009蔬菜中敌菌灵残留量的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了新鲜蔬菜中敌菌灵残留量的高效液相色谱测定方法。本标准适用于番茄、菜豆、黄瓜、甘蓝、白菜、芹菜、胡萝下等蔬菜中敌菌灵残留量的测定。本标准方法的检出限为0.01mg/kg。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理在弱酸性条件下用乙提取试样中敌菌灵，加氯化钠盐析分层，经弗罗重硅土固相萃取柱净化后用高效液相色谱仪进行分离。敌菌灵苯环上的元电子在波长250nm处被激发，其吸收强度由紫外检测器检测。分别记录标样和试样的峰高，根据色谱峰的保留时间定性，外标法定量，4试剂和材料除非另有说明，在分析中仅使用分析纯试剂和GB/T6682中规定的至少二级水。4.1氯化钠(NaCI)。4.2甲醇(CH:OH)：色谱纯。4.3正已烷（CH14）：色谱纯。4.4丙酮(CH.O)：色谱纯。4.5乙腈(CHCN)：色谱纯。4.6磷酸(H:PO4)。4.7丙酮十正已烷混合溶液（1十19）。4.83丙酮十正已烷混合溶液（15十85）。4.9磷酸溶液［（HsPO4）=1%：称取10g磷酸（4.6），加水至1000mL，摇匀。4.10敌菌灵标准品：纯度≥98%。4.11敌菌灵标准贮备液：准确称取0.1mg敌菌灵标准品，用甲醇（4.2）溶解并转移至100mL容量瓶中，再用甲醇（4.2)定容至刻度，得到质量浓度约为1000mg/L的敌菌灵标准贮备液。贮于一20℃～一16℃冰柜中备用。有效期为2个月。4.12敌菌灵标准工作溶液：使用时将敌菌灵标准贮备液（4.11)用甲醇（4.2)稀释得到质量浓度为0.5mg/L的敌菌灵标准工作溶液。有效期为.1周。4.130.45μm有机微孔滤膜。4.14固相萃取柱，填料为弗罗里硅土，容积6mL，填充物1g。1 NY/T1722—20095仪器5.1高效液相色谱仪，配有紫外检测器。5.2分析天平，感量0.1mg和0.01g。5.3食品加工机。5.4均质器，6000r/min~36000r/min。5.5旋转蒸发仪。5.6氮吹仪。6试样制备将蔬菜样品取可食部分，用干净纱布轻轻擦去样品表面的附着物，采用对角线分割法，取对角部分，将其切碎，充分混匀，用四分法取样或直接放人食品加工机中捣碎成匀浆。匀浆放人容器（除聚氯乙烯材质外）中，于一20℃～一16℃条件下保存。称取试样前，常温试样应搅拌均匀，冷冻试样应先解冻再混匀。7分析步骤7.1提取称取试样20g（精确至0.01g）于150mL烧杯中，向烧杯中加人1.00mL磷酸溶液（4.9），然后加人50.0mL乙睛（4.5），高速均质约1min。滤液经滤纸过滤至装有7g～10g氯化钠（4.1）的具塞玻璃试管中，盖上塞子，剧烈振荡约1min，在室温下静止2h以上或使用离心机离心，使得乙睛相和水相充分分层（若有乳化现象，加少量蒸馏水振摇后继续分层）。用移液管准确吸取10.00mL乙睛提取液至50mL圆底烧瓶中，在旋转蒸发仪上（水浴温度40℃）浓缩至近干，加人3.0mL正已烷（4.3)待净化。7.2净化依次用3mL丙酮一正已烷混合溶液（4.7）和4mL正已烷（4.3）预淋弗罗里硅土柱，弃去流出液。当正已烷液面到达柱吸附层表面时，立即倒人7.1中得到的溶液，用15mL丙酮一正已烷混合溶液（4.8)分三次冲洗烧杯后淋洗弗罗里硅土柱（4.14），用100mL烧杯接收洗脱液。将盛有洗脱液的烧杯置于氮吹仪上，在水浴温度40℃条件下，氮吹蒸发至完全干燥，用4.00mL甲醇（4.1)溶解蒸残物，用微孔滤膜（4.13)过滤至2mL样品瓶中，待测。7.3色谱参考条件7.3.1色谱柱：C8不锈钢柱，柱长250mm，内径4.6mm，粒径5μm，或相当者。7.3.2流动相：A：水，B：乙睛，按表1进行梯度洗脱。表1敌菌灵含量测定不同时间流动相比例表时间流