SN_T 3039-2011出口动物源性食品中安眠酮残留量的测定 高效液相色谱法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3039--2011出口动物源性食品中安眠酮残留量的测定高效液相色谱法Determination of methaqualone residues in animal original food forexport-High performance liquid chromatographic method2011-09-09 发布2012-04-01实施中华人民共和布国家质量监督检验检疫总局30教码防计 SN/T 3039--2011言前本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国广东出人境检验检疫局负责起草本标准主要起草人：吕飞、周宇、黄刚、曹维强、吴云普。I SN/T 3039—2011出口动物源性食品中安眠酮残留量的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了出口动物源性食品中安眠酮残留量检验的制样和高效液相色谱测定方法。本标准适用于猪肉、猪肝、猪肾和奶中安眠酮残留量的测定2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要试样中的安眠酮用二氯甲烷提取，提取液经浓缩、固相萃取柱净化底，用高效液相色谱仪检测。外标法定量。4试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水伪GB/T6682规定的一级水。4.1乙腈：高效液相色谱纯。4.2甲醇：高效液相色谱纯。4.3丙酮：高效液相色谱纯。4.4正已烷：高效液相色谱纯。4.5二氯甲烷：高效液相色谱纯。4.6乙酸铵。4.7氢氧化钠。4.8无水硫酸钠：经650℃灼烧4h，置于干燥器内备用。4.9乙酸铵溶液（25mmol/L）：准确称取乙酸铵1.925g，用水定容至1000mL。经0.45um水相滤膜过滤。4. 10氢氧化钠（1mol/L）：称取 40g氢氧化钠溶解于800mL水，容量瓶定容至1L。4.11氢氧化钠(0.1mol/L):称取 4g氢氧化钠溶解于 800 mL水，容量瓶定容至1 L。4. 12乙睛饱和正已烷：正已烷与足够的乙腈混合，至饱和。4. 13洗脱液：乙腈十丙酮（5十5，体积比），取50mL乙腈，加人50mL丙酮，混匀备用。4.14流动相：乙腈+25mmol/L乙酸胺（4+6，体积比），取400mL乙腈，加入600mL25mmol/L乙酸胺（4.9），超声混匀备用。4.15安眠酮标准品（methaqualone，CisHi4 N²O，相对分子质量 250.29，CAS 号：340-56-7）：纯度99.0%。1. SN/T 3039—20114.16安眠酮标准储备液：准确移取安眠酮标准品（4.15)1.00mL，浓度为10.00mg/L，用乙腈稀释并定容至10mL，浓度为1.00mg/L,0℃～5℃冰箱保存。根据需要再配成适用浓度的标准工作溶液。4.17固相萃取柱：60 mg/3 mL HLBC：SPE,或其他等同效果的固相萃取柱。4.18有机相、水相针头滤膜：0.45μm。51仪器和设备5.17高效液相色谱仪带紫外可见波长检测器或二极管阵列检测器。5.2离心机:转速不低干4000r/min。5.3旋转蒸发仪。5.4　分析天平:感量 0.0001 g。5.5涡旋振荡器。5.6 匀浆机。5.7肉类组织粉碎机。5.8超声波水浴。5.9固相萃取装置。5.10 离心管:50 mL,5 mL。6样品的制备和保存取样品去皮去筋约500g，用肉类组织粉碎机绞碎，装入洁净容器作为试样，密封，并标明标记。制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。试样置于一18℃以下保存，奶试样置于0℃～4℃ 以下保存。7提取和净化7.1　提取7. 1. 1 肌肉组织、肝脏、肾脏等称取 5g(精确到0.01g)组织样品和 10g无水硫酸钠(4.8)于50 mL离心管中,加人1mL1mol/L氢氧化钠和20mL二氯甲烷提取液，均质提取1min，4000r/min离心5min，上清液经快速定性滤纸过滤到100 mL浓缩瓶中,残渣用20 mL二氯甲烷超声提取 10 min，4000 r/min离心5min，合并二氯甲烷,40℃旋转蒸发至干。残留物(7.1.1)中加人1mL流动相（4.14）,充分涡旋振荡,转移至5mL离心管中，加人3mL乙腈饱和正已烷（4.12），涡旋混匀，4000r/min离心5min，弃去上层正已烷层，原离心管中再加人3mL乙腈饱和正已烷，涡旋混匀，4000r/min离心5min，下层加0.1mol/L的氢氧化钠稀释至 5mL作待净化液。7.1.2奶类等称取2g(精确到0.0