SN_T 3502-2013盐酸克伦特罗纳米磁快速检测方法 试纸法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3502--2013盐酸克伦特罗纳米磁快速检测方法试纸法Rapid screen of clenbuterol residues with nano magnetic particles-Immunechromatographic assay2013-09-16实施2013-03-01发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局0刮涂层查真# 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准盐酸克伦特罗纳米磁快速检测方法试纸法SN/T 3502--2013*中国标准出版社出版北京市朝阳区和平里西街甲2号（100013)北京市西城区三里河北街16号（100045）总编室：（010址 www. spc. net. cn中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本 880×1230 1/16印张0.5字数 10 于字2013年8月第一版反　2013年8月第次印刷印数 11 600* 书号：155066·2-25854 SN/T 3502—2013前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容有可能涉及专利。本文件的发布机构不应承担识别这些专利的责任。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院、清华大学深圳研究生院、深圳市外来有害生物质检测技术研发重点实验室。本标准主要起草人：秦智锋、卢体康、孙洁、马岚、吕建强、花群义、陈书琨、曾少灵、林庆燕、曹琛福、吴峰、陈兵、阮周曦、杨俊兴、陶虹、袁航、张彩虹、宗卉、刘建利、廖立珊。I SN/T 3502—2013盐酸克伦特罗纳米磁快速检测方法试纸法1范围本标准规定了采用纳米磁免疫层析法，对动物源性食品、饲料和猪尿液中的盐酸克伦特罗残留进行快速筛选检测。本标准适用于动物源性食品、饲料和尿液等样品中盐酸克伦特罗残留快速筛选定性检测。本标准检测下限为0.1 μg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料　采样GB/T18088出人境动物检疫采样SN/T2123出人境动物检疫实验样品采集、运输和保存规范3原理本方法是免疫层析法中的竞争抑制法，其主要原理是：通过将牛血清白蛋白偶联盐酸克伦特罗抗原、抗鼠IgG抗体、纳米超顺磁标记的抗盐酸克伦特罗抗体和其他试剂囤着在硝酸纤维素膜、玻璃纤维素膜等纸膜材上制成检测试纸，应用层桩式竞争法原理检测样品中的盐酸克伦特罗残留。样品中的盐酸克伦特罗在流动的过程中与玻璃纤维索膜上纳米磁珠标谭的特异性抗盐酸克伦特罗抗体结合，抑制了抗体和硝酸纤维素膜检测线上牛血清白蛋白-盐酸克伦特抗原偶联物的结合，使检测线上结合的纳米磁珠的量减少，使用磁性试纸判读仪测定检测线得到的磁强数值与样品中的盐酸克伦特罗含量成反比。4　试剂与仪器4.1试剂4.1.1试剂级别除另有规定，本方法试验用水应符合GB/T6682规定的二级水，所用化学试剂均为分析纯。4.1.2盐酸克伦特罗纳米磁免疫层析快速检测试纸。4.1.3冲洗液（配方见附录A的A.1）。 mol/L盐酸溶液。 mol/1氢氧化钠溶液。4.1.6 pH7.4 0.02 mol/L PBS 溶液(配方见 A.2)。 SN/T 3502—20μg/L盐酸克伦特罗阳性标准品溶液（配方见A.3）。4.1.8盐酸克伦特罗阴性猪尿样：不含有盐酸克伦特罗残留且经气相-液相-液相(LC/MS/MS)仪器确证为阴性的尿液、肌肉、组织或血液样本。4.1.9空白对照:冲洗液。4.2仪器4.2.1超顺磁共振检测仪。4.2.2 离心机。4.2.3涡旋式混合器4.2.4匀浆器。4.2.5微量移液器：50μL、100μL和1000μL单通道移液器。5　样品采集、保存与运输5.1样品的采集样品的采集、保存及运输应符合GB/T14699.1、GB/T18088和SN/T2123的相关采样要求。5.2样品的运输与保存饲料样品可于常温运输，其余样品应置于低温、密封的容器内运输和保存。6样品制备6. 1 肌肉、肝脏制样称取肌肉或肝脏5.0g，加人10mL0.1mol/L盐酸溶液于匀浆器中充分匀浆，再置于80℃水浴中加热30min，取出后冷却，4000g离心15min。用移液器吸取1ml上清液于玻璃管中，用1mol/.氢氧化钠溶液调节 pH至 7.0～9.0后待检。6.2尿液制样澄清的尿液可直接用于检测;若尿液混浊，需要 4000 g离心5 min后待检。6.3 血液制样血清或血浆 4000g离心5 min,取上清液用 pH7.