SNT 1718-2006出入境口岸回归热检验规程.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1718—2006出入境口岸回归热检验规程Examination codes of relapsing fever at entry-exit port2006-01-26 发布2006-08-16实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局性层技的的荐查讨]，数码防伪 SN/T 1718—2006言前本标准的附录 B为规范性附录,附录 A、附录 C、附录 D为资料性附录本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国深圳出人境检验检疫局。本标推主要起草人：初月、古莉冰、朱玉兰、孙颖、张树平、徐媛。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 SN/T 1718--2006出入境口岸回归热检验规程1 范围本标准规定了人出境口岸回归热的检验对象、方法、结果报告、阳性结果处置。本标准适用于入出境口岸的回归热检验。2 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。2. 1回归热relapsing fever由疏螺旋体引起，以节肢动物为媒介传播的急性传染病。3 对象3.1疑似感染回归热螺旋体的人出境人员。3.2采集来自流行区动物身上的虱、蜱。4标本的处理4. 1 血液标本发热期病人（体温在39℃以上）的血液标本采集后，室温放置1h后，用离心机3000r/min离心15min,吸取血清进行检测。离心后的血清如在3d内检测,可放于2℃～8℃冰箱保存;3d以上短期保存的，可在一20℃冰箱保存，长期保存,应在一80℃冰箱保存。4.2 尿液标本新鲜尿液标本 3 mL～~5 mL立即送检。4.3媒介标本采集的虱、蜱10个以上用500μL EDTA-Na²清洗，晾干。液氮保存或一80℃以下保存。5 准备检验试剂的准备参见附录 A。6 实验室检验方法人出境口岸回归热螺旋体实验室的检验方法如下：一显微镜检测，见附录 B;血清学检测，参见附录C;聚合酶链反应(PCR)检测,参见附录 D。７结果报告7.1显微镜检验报告7.1.1直接用暗视野显微镜检查或经染色后镜检，如见到卷发样，长约为红细胞直径的2倍～5倍的疏螺旋体，即可报告检出回归热螺旋体”；没有发现，报告未检出回归热螺旋体”，同时注明检测方法。7.1.2全血棕黄色层定量分析(QBC)，见到发荧光的螺旋体集中在交界面时，报告“检出回归热螺旋1 SN/T 1718—2006体”；没有发现，报告“未检出回归热螺旋体”7.1.3动物接种后每日采血镜检，于1 d～2 d见到大量螺旋体,报告：“经×日动物接种，检出回归热螺旋体”；没有发现，报告：“经动物接种，未检出回归热螺旋体”。7. 2血清学、PCR 检验报告7.2. 1检验结果为阴性,报告“阴性”,并注明检测方法。7.2.2检验结果为阳性,报告“阳性”,并注明检测方法。8阳性结果的处置对初次回归热菌株及相应标本应送上级实验室(或指定的实验室)做复检或鉴定。阳性结果应在12h内向上级主管部门及当地的卫生行政机关报告：2 SN/T 1718—2006附录A（资料性附录）回归热螺旋体检验主要试剂及器材A.1 主要试剂A.1.1培养基的主要成分A.1.1.1 BSKH 培养基精氨酸57.mg/L，柠檬酸700mg/L，2°-脱氧胞嘧啶-盐酸11.6mg/L，黄素腺嘌呤二核苷酸0.106mg/L，硫酸镁97.69mg/L，乙酸钠50mg/L,磷酸二氢钠122mg/L，葡糖酸钠3.88mg/L。A. 1. 1. 2 BSK1 1精氨酸70mg/L，柠檬酸钠800mg/L,2-脱氧胞嘧啶10mg/L，黄素腺嘌呤二核苷酸1.0mg/L,凝胶14000 mg/L,硫酸镁 200 mg/L,乙酸钠83mg/L,磷酸二氢钠140mg/L,葡糖醛酸钠4.2mg/L。A.1.1.3 MKM培养基包含 0.7XCMRL-1066(包含 Neopepton 2.1 g/L,HEPES 4.2 g/L,Na-citrate 0.5 g/L),葡萄糖3.5g/L,丙酮酸钠0.56g/L,N-乙酰氨基葡萄糖0.28g/L，碳酸氢钠（NaHCO;)1.5g/L,5%加热失活兔血清,牛血清白蛋白34 g/L;凝胶10 g/L。A.1.2 血清学试剂的配制A. 1.2. 1 TBS-T(pH7.4)三羟甲基氨基甲烷(Tris)2.42 g氯化钠(NaCl)8.19 g氯化钾(KCI)0.20 g.Tween-2050 μL蒸馏水1 000 mLA.1.2.2EIA封闭液胎牛血清30 mLTBS-T:1 000 mLA. 1.2.3 TSE-Tween 溶液(pH7. 4)...4三羟甲基氨基甲烷(Tris)6.05 g氯化钠(NaCI)8.78 g:EDTA1.46 gTween-2050 μl.蒸馏水1 000 mLA. 1.