自来水中细菌总数的测定.docVIP

自来水中细菌总数的测定 摘要 水中细菌总数可说明被有机物污染的程度～细菌数越多～有机物含量越大。本实验应用平板菌落记数技术测定水中细菌总数。由于水中细菌种类繁多～他们对营养和其他生长条件的要求差别很大～不可能找到一种培养基在一种条件下～是水中所有的细菌均能生长繁殖～ [1]因此～以某种培养基平板上生长出来的菌落～计算出来的细菌总数仅是近似值。本实验采用普通营养琼脂培养基～该培养基营养丰富～能使大多数细菌生长。所谓细菌总数～是指在1mL水样在普通营养琼脂培养基中～37?经24h培养后～所生长出来的菌落数。通过培养观测得到平均1mL自来水中含有85个细菌菌落～符合国家标准。 关键词 自来水 平板菌落计数技术 细菌总数 测定 水是生命之源，人的生存离不开水环境，水质的好坏对人们生活起着至关重要的作用，引言 [2]而判断水质的标准，微生物在水中的数量、种类是必不可少的。良好的饮用水细菌总数应100 CFU?mL,而500 CFU?mL则不适宜饮用，我国饮用水卫生标准(GB5749-85)规定， [3]每毫升水样中细菌总数37?培养24h不得大于100个。细菌种类对人类健康更为重要，许多致病细菌常常存在于水中，人们饮用后引发各种疾病，如痢疾，伤寒等，大多是饮用水污染了这些病原菌之故，因而测定饮用水中的病原菌是必需的。本实验只包括一群能在营养琼脂上发育的嗜中温的需氧的细菌菌落总数。通过此实验我们能够计算出水中的细菌总数，从而判断自来水是否符合国家标准，是否受到污染。我们可以了解水质评价的微生物学卫生标准和本地区自来水的卫生状况，从而不断的改善并很好的治理。 1材料与方法 1.1 时间与地点 2010年10月27日 太原师范学院南区微生物实验室 1.2 实验材料 牛乳膏蛋白胨琼脂培养基、自来水、蒸馏水、烧杯、玻璃棒、培养皿、电炉、高压蒸汽灭菌锅、天平、量筒等 1.3方法 [4]1.3.1牛乳膏蛋白胨琼脂培养基的制备 计算并称量一定量的普通标准琼脂培养基固体置于烧杯中，先加入少于所需要的水量，用玻璃棒搅拌，然后再电炉上加热使其溶解，完全溶解后补充水量至所需的总体积，不断搅拌直至沸腾，沸腾后继续加热3 ~5分钟。 1.3.2 自来水样的检测 将培养皿，吸量管，锥形瓶等仪器在高压蒸汽灭菌锅中灭菌。用灭菌吸管吸取1mL水样，注入灭菌培养皿中。共做2个平皿。分别倾注两个15mL以熔化并冷却到45?左右的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，并立即放在平整的桌面上，做平面旋转摇动，使水样与培养基充分混匀。另取一灭菌培养皿，不加水样，倾注牛肉膏蛋白胨琼脂培养基15mL，作空白对照。培养基凝固后，倒置在37?，培养24h，进行细菌计数。两个平板的平均细菌菌落数为1mL [5]自来水的细菌总数。 2 结果与分析 自来水细菌总数测定的实验结果 -1平 板 菌 落 数 自来水中细菌总数?(CFU ?mL) 0 空 白 1 78 85 2 92 由此可得:该自来水样中每毫升的细菌总数为85个，符合我国饮用水标准规定的每毫升水样中细菌总数不得大于100个 ，该自来水水质合格。 3 讨论 3.1本实验中的注意事项 高压蒸汽灭菌锅使用时，切勿忘记加水，同时加水量不可过少，以防灭菌锅烧干而引起炸裂事故;灭菌的主要因素是温度而不是压力，因此锅内冷空气必须完全排尽后，才能关上 [6]排气阀，维持所需压力。压力一定要降到0时，才能打开排气阀，开盖取物。标准琼脂培养基的熔化时因不断搅拌，以免琼脂糊底烧焦，沸腾后继续加热3 ~5分钟。倾倒培养基时要确保培养基的温度在45?左右，以免温度过高烫死细菌，温度过低感染杂菌且培养基凝固无法平面旋转摇动使水样与培养基充分混合。菌落培养时应倒置培养基，这样菌落就可以 [7]长在培养基表面，有利于菌落的计数。 3.2 误差分析 取自来水样时，由于自来水管是塑料的无法用火焰灼烧灭菌，水样可能会被自来水管口 [8]的杂菌污染，自来水样置于锥形瓶中暴露在空气中的时间过长，遭空气中的杂菌污染。 倾倒培养基时，培养基的温度降至45?以下，导致其他微生物的生长，而受到污染。 3.3还需进一步探讨的问题 计数时，菌落的大小是否应该定一个十分精确的标准;可能培养基内部还长有一些菌落 [9]这会不会影响实验结果;在培养过程中细菌之间的相互抑制是否对结果有影响。 4 结论 实验用普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基在保证无菌的环境下，采取自来水的样品，利用培养基制作平板，在37?温箱中，培养24h，进行菌落记数。通过与国家标准进行对比可知在 [10]国家标准范围之内，属于合格自来水。 参考文献 [1]顾孔珍 钱纯 罗岳平.用R2A Agar培养基提高饮用水中细菌总数的检出率[J] 净水技术,2004,23(1):42-43 [2]