临床PCR检验标本的处理、保存及核酸提取方法.pptVIP

临床PCR检验标本的处理、保存及核酸提取方法;临床标本的正确采集、运送、保存的重要性;核酸提取的重要性;标本采集;标本运送 ;临床标本的处理和保存;血清（浆）;全血;外周血单个核细胞 ;痰;痰标本处理的基本模式;痰标本处理通用模式;;痰标本处理简单模式 ;;痰标本处理中要注意的问题;棉拭子;脓液;体液;乳汁;乳汁中布鲁菌DNA的提取;;乳汁中分枝杆菌DNA的提取;;组织 ;临床标本的滤纸上保存;临床标本中PCR反应抑制物;肝素的作用机理 ;血红蛋白、乳铁蛋白（lactoferrin）;血红蛋白;IgG ;去除或减轻抑制的一些方法;去除或减轻抑制的一些方法;核酸纯化;一般核酸提取试剂促使靶核酸从细胞内释出的原理;核酸的分离纯化 ;DNA提取的经典方法;;RNA提取的独特性; RNA提取所用器皿的处理;RNA提取所用溶液的准备 ;RNA提取中RNase 污染的控制;RNA提取的常用方法 ;异硫氰酸胍（GuSCN）结合氯仿-酚提取法 ;核酸提取的改良方法 ;旋转离心柱（SPIN COLUMN）;;;玻璃粉吸附法 ;二氧化硅（Se）或硅藻吸附法 ;使用NaI的微量全血核酸提取法 ;;靶核酸提取的质量 ;临床标本核酸提取中可能存在的非源自标本的抑制和干扰物质 ;核酸样本制备及扩增检测的质控;对临床标本中可能存在的抑制/干扰物的质控措施;谢谢！;Magnetic Resonance Imaging;发生事件;MR成像基本原理;实现人体磁共振成像的条件:; 人体内的H核子可看作是自旋状态下的小星球。 自然状态下， H核进动杂乱无章，磁性相互抵消;; 三、弛豫（Relaxation） 回复“自由”的过程 ?1. 纵向弛豫（T1弛豫）： M0（MZ）的恢复 ，“量变” 高能态1 H → 低能态1 H 自旋—晶格弛豫、热弛豫;T1弛豫时间： MZ恢复到 M0的2/3所需的时间 T1愈小、M0恢复愈快 ;T2弛豫时间： MXY 丧失2/3所需的时间； T2愈大、同相位时间长 MXY持续时间愈长 ;T1加权成像、T2加权成像 所谓的加权就是“突出”的意思 T1加权成像（T1WI）----突出组织T1弛豫（纵向弛豫）差别 T2加权成像（T2WI）----突出组织T2弛豫（横向弛豫）差别。 ; 磁共振诊断基于此两种标准图像 磁共振常规h检查必扫这两种标准图像. T1的长度在数百至数千毫秒（ms）范围 T2值的长度在数十至数千毫秒（ms）范围 在同一个驰豫过程中,T2比T1短得多 ;如何观看MR图像 ： 首先我们要分清图像上的各种标示。分清扫描序列、扫描 部位、扫描层面。 正常或异常的所在部位---即在同一层面观察、分析T1、T2加权像上信号改变。 绝大部分病变T1WI是低信号、T2WI是高信号改变。只要熟悉扫描部位正常组织结构的信号表现，通常病变与正常组织不会混淆。 一般的规律是T1WI看解剖,T2WI看病变。;磁共振成像技术－－图像空间分辨力，对比分辨力 一、如何确定MRI的来源 （一）层面的选择 1. MXY产生（1H共振）条件 RF = ω=γB0 2. 梯度磁场Z（GZ） GZ→B0→ω 不同频率的RF 特定层面1H激励、共振 3. 层厚的影响因素 RF的带宽 ↓ GZ的强度 ↑ 层厚↓ ;〈二〉体素信号的确定 1、频率编码 2、相位编码 M0↑--GZ、RF→ 相应层面MXY ---------- GY→沿Y方向1H有不同ω 各1H同相位 MXY旋进速度不同 同频率 一定时间后→ → GX→ 沿X方向1H有不同ω 沿Y方向不同1H 的MXY MXY旋进频率不同 位置不同（相位不同） ;〈三〉空间定位及傅立叶转换 GZ----某一层面产生MXY GX----MXY旋进频率不同 GY----MXY旋进相位不同 （不影响MXY大小） ↓ 某一层面不同的体素，