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基于图像处理技术的植物叶片面积测量 非选择性测量与其它测量的比较 叶面积是植物气机的一个重要因素，包括植物光合作用、水循环、能量交换、水果生长等。它还应被用于研究植物育种和遗传育种的指标[1.2]。准确测量叶面积对研究植物生长和了解作物与生长环境之间的相互影响都有非常重要的意义。植物叶面积测量方法可分为破坏性测量和非破坏性测量[3~5]。破坏性测量的优点是测量步骤简单, 测量结果可靠, 缺点是需要从植株上把叶片摘下来, 这使得同一叶片不能得到连续追踪测量, 同时, 植物冠层也会受到损害, 这些损害还可能进一步影响其他研究的结果[6~7], 而且, 这种实验需要足够多的样本。非破坏性测量的优点是节约时间, 测量结果准确, 其最大的优势是允许重复追踪同一片叶子, 缺点是测量仪器设备昂贵, 有些仪器设备还不利于携带。 近几年来, 很多学者投入到基于图像处理的叶面积测量应用方面的研究[9~16], 基于计算机系统的叶面积测量仪能快速准确测量出叶面积, 但该技术的仪器一般都比较笨重, 不利于携带, 大多数情况下需要把叶片摘下来测量, 是一种破坏性测量。便携式扫描叶面积测量仪虽然具备携带方便的优势, 但适合测量秧苗叶片的仪器则测量不了宽大叶片的面积, 反之, 适合测量宽大叶片面积的仪器则很难测量植物秧苗的叶片。而且, 该仪器扫描头的精度决定该仪器的价格, 精度高的价格昂贵, 精度低的不太适合大部分科学研究。 基于Android系统的智能手机具备CPU主频高、运行速度快、屏幕宽和分辨率高、摄像头像素高、内存大等优势, 适用于叶面积测量的软件应用开发, 而且, 手机还是大部分人随时携带的通信工具, 应用者无需购置处理平台硬件设备。本文设计一种基于Android系统手机及其图像处理功能来测量叶面积的方法。使用手机的触摸屏幕作为工作平台, 而不需要给手机增加额外的硬件。 1 材料和方法 1.1 u3000热容量和色定位板、提取液深度计算 实验设备包括工字架, 刻度参照板, 厚度小于2 mm且透光度大于92%的亚克力板, 米尺, LI-3100型叶面积仪, 三星I9300型智能手机, 手机内置Android 4.0操作系统, 其CPU为4核主频1.4 GHz, 800万像素摄像头, 1 GB内存, Android-SDK, 集成开发环境Eclipse, ADT插件, 计算机, 白纸和打印机。工字架上、下两端及连接杆均可伸缩和拔插, 一端有可以180°旋转的固定夹, 用来固定手机位置;另一端用来固定刻度板, 能确保手机平面和刻度板平面平行, 如图1所示。刻度参照板是在平整的白纸上打印10 mm×10 mm的棋盘格, 根据树叶的大小, 白纸的中间部分不打印正方形, 将该打印有棋盘格的白纸固定在不易变形的硬塑料板上便形成了刻度参照板, 叶面积计算时, 把棋盘格中的黑色正方形当作标准刻度。实验对象为茄子、西红柿和枫树叶片。 1.2 实验方法 1.2.1 叶茎和刻板的高度设计 对于正常生长的植株上的叶片, 根据植物叶片表面情况, 叶片的图像采集有两种方式: (1) 针对没有完全展开但表面光滑可以直接接触的叶片, 如柑橘叶、油菜叶等, 图像采集时, 在刻度参照板的X轴上对称挖宽约3 mm的凹槽, 供叶茎通穿, 该凹槽的长度根据叶茎和刻度板长短而定, 叶茎通过凹槽能达到合适测量位置即可, 必须保证叶茎通过凹槽时无刮伤。拍照时, 将叶片贴放在白纸中间的空白部分, 刻度参照板放在叶片下面作为背景底板, 叶柄通过刻度板中间的槽, 把叶片移放到刻度参照板合适的位置, 并使待测叶片平展于底板上, 再用亚克力板压平, 确保叶片完全舒展, 如图2a所示。 (2) 对于在自然状态下能完全舒展开的叶片, 由于有些其表面绒毛比较多, 直接接触可能会破坏其正常生长机理, 如黄瓜、西红柿叶片等, 则在刻度板的中间挖出合适大小的凹槽, 使叶片能摆放在其中间, 拍照时, 将刻度板与叶片尽量保持在同一水平面, 如图2b所示。 不管采用哪种图像采集方式, 图像中被研究的叶片与其他叶片不能存在交叉覆盖现象, 因为这不仅增加图像分割的难度和影响图像处理的速度, 而且影响叶面积测量结果的精度。 1.2.2 叶片的测量和判别 图像分割的目的是要从研究对象的图像中精确地把研究对象分离出来, 然后对分离的结果进行滤波去噪, 以提高测量的精度。最简单的方式是寻找一个合适的灰度阈值能够把研究对象直接分离出来。 严格地说, 本研究的图片中只有3种颜色, 它们分别是白色背景、刻度参照正方形的黑色和研究对象叶片的颜色。考虑到这些因素, 为了把要测量的叶片和参照刻度从有背景的图片中分离出来, 本方法要求测量者在触摸屏显示的拍摄图片平面上, 用触摸笔在要测量的叶片周围任意画一个封闭圈, 该封闭圈不能和被测叶片或与该叶