人源igm转基因小鼠制备全人源抗狂犬病病毒单抗的研究.docxVIP

人源igm转基因小鼠制备全人源抗狂犬病病毒单抗的研究 根据流行病学研究，近年来，中国因狗伤口和狂犬病死亡的患者数量逐年增加，已成为严重的公共卫生和社会问题。WHO建议三级暴露接触后的治疗包括注射抗狂犬病免疫球蛋白和接种疫苗。目前大多使用血源性免疫球蛋白,但血源性免疫球蛋白成本高且产量极低,难以满足预防用药需求,并且血源产品质量难以控制,存在潜在病毒感染的风险以及容易引起过敏反应。全人源或人源化治疗性单克隆抗体药物给狂犬病病毒接触后的预防和治疗提供了新的解决方法,以全人源治疗性单克隆抗体药物取代目前大量使用的血源性免疫球蛋白,已成为国内外临床医学和生物制药专家的共识。最近Pruzina等合作研究并成功地利用人源Ig M转基因小鼠制备出抗HIV gp140全人源单抗。本研究组在国内首次采用从英国医学研究理事会和剑桥大学引进的人源Ig M转基因小鼠,结合杂交瘤技术及高通量酶联免疫吸附试验(ELISA)交叉筛选技术,制备了2株特异性、高亲和力的抗狂犬病病毒全人源单抗,为进一步筛选人源抗狂犬病病毒免疫预防性中和抗体及其免疫治疗的应用奠定了基础。 1 材料和方法 1.1 细胞、病毒糖蛋白和细菌糖蛋白 灭活狂犬病病毒CTN株由武汉生物制品研究所馈赠,6~8周龄以C57BL/6J小鼠背景的雄性人源Ig M转基因小鼠由上海麦柏星生物科技有限公司独家从英国医学研究理事会(MRC)和剑桥大学引进和授权