DB35T 1928-2020茄子抗枯萎病鉴定技术规范.docxVIP

福建省市场监督管理局 发 布 ICS 65.020.01 B 15 福 建 省 地 DB35 方 标 准 DB35/T 1928—2020 茄子抗枯萎病鉴定技术规范 Technical specification for evaluation of eggplant (Solanum melongena L.) resistance against fusarium wilt 2020 - 09 - 29 发布 2020 - 12 - 29 实施 I DB35/T 1928—2020 目 次 前言 II 1 范围 1 2 术语和定义 1 3 培养基的配制 2 4 接种体制备 2 5 室内抗性鉴定 3 6 病情调查 3 7 抗病性评价 4 8 鉴定材料处理 5 附录 A(资料性附录) 科赫(koch)法则 6 II DB35/T 1928—2020 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由福建省农业科学院提出。 本标准由福建省农业农村厅归口。 本标准起草单位： 福建省农业科学院作物研究所、福建省标准化研究院、福建省标院信息技术有限 公司、福州市蔬菜科学研究所。 本标准主要起草人： 林珲、温庆放、王彬彬、薛珠政、李大忠、李永平、马慧斐、裘波音、陈继兵、 黄建都。 1 DB35/T 1928—2020 茄子抗枯萎病鉴定技术规范 1 范围 本标准规定了茄子(SolanummelongenaL.)抗枯萎病鉴定培养基的配制、接种体制备、室内抗性 鉴定、病情调查、抗病性评价及鉴定材料处理。 本标准适用于茄子枯萎病室内抗病性鉴定和抗性评价。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 茄子枯萎病 eggplant fusarium wilt 由尖孢镰刀菌茄子专化型(Fusariumoxysporumf. sp. melongenaeMatuo et Ishigami Schlecht.) 引起的土传性病害。 2.2 接种体 inoculum 用于接种以引起茄子植株枯萎病的病菌分生孢子悬浮液。 2.3 室内抗病性鉴定 evaluation of disease res istance in greenhouse 在室内模拟自然环境， 采用伤根浸根法接种， 将茄子枯萎病菌按一定浓度接种于茄子植株上， 通过 调查茄子的发病情况，对参鉴茄子品种进行抗性评价的抗病性鉴定方法。 2.4 伤根浸根法 root dip method with wounded root 将茄子苗的根部用剪刀制造伤口， 将苗浸入茄子枯萎病菌悬浮液中， 移栽入经灭菌处理的无病菌洁 净土壤或基质中，使其感染枯萎病菌的接种方法。 2.5 病情级别 disease rating scale 人为定量茄子个体或群体发病程度的数值化描述。 2.6 病情指数 disease index； DI 通过对茄子个体发病程度(病情级别)数值的计算所获得的群体发病程度的数值化描述。 2.7 抗性评价 evluation of resistance level 根据采用的技术标准判别茄子对特定病害反应程度和抗性水平的描述。 2 DB35/T 1928—2020 3 培养基的配制 3.1 马铃薯固体培养基 马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g。将马铃薯去皮、切成小块，水煮沸30 min， 纱布过滤。加 入葡萄糖和琼脂粉，将滤液定容至1 000 mL，121 ℃高压灭菌 20 min。 3.2 马铃薯液体培养基 除不使用琼脂外，配方与制备方法均按3.1的规定执行。 4 接种体制备 4.1 枯萎病菌的分离与保存 4.1.1 枯萎病菌的分离 对收集的茄子枯萎病病株，应采取新鲜病株的发病组织与健康组织交界处用75%乙醇消毒30 s，无 菌水冲洗3~4次，再用1%的次氯酸钠溶液(有效氯9.5 g/L~10.5 g/L)浸泡5 min，无菌水冲洗3~4 次，用无菌切割刀切取0.3 cm×1.0 cm的木质部薄片， 置于含有100 μg/mL链霉素的培养基平板上，在 26 ℃恒温箱中培养。 4.1.2 枯萎病菌的纯化 在培养基接种处切取一块0.4 cm×0.8 cm的菌饼，放置于1.5 mL离心管中，加800 μL无菌水，剧 烈振荡1 min，制备成孢子悬浮液；吸取孢子悬浮液15 μL，用血球计数器计数，并配制成浓度为 100 个/mL~1 000 个/mL的孢子悬浮液；吸取150 μL孢子悬浮液均匀涂布于培养基上，26 ℃下培养60 h后，挑选枯萎病病菌单孢菌落于新的培养基上，用于保