生化分析常见交叉污染探讨与对策.pptxVIP

生化分析常见交叉污染探讨与对策;— 如何理解交叉污染;引发交叉污染的原因;二 交叉污染的分类;三 不同类型交叉污染的鉴别方法及原因;样本针携带污染率试验（一）;测试顺序：3L 2H 1L 2H 4L 2H 1L 2H 1L 2H 1L （注上述顺序前的数字代表测试数量，如3L代表连续测试3个低值样本） 定义：L – L 值为紧跟在低值标本后低值标本的结果。 H – L 值为紧跟在高值标本后低值样本的结果 携带污染指标= H – L结果的平均值– L – L结果的平均值 判断标准： 当携带污染指标小于 3SD SD是( L – L ) 结果的SD值。;试剂针携带污染;第1页/共37页;携带污染实验方案;试剂针携带污染实验方法;表3中显示了试剂之间携带污染初实验后的结果: a 将表格内测试顺序号代表的位置处 输入该项目对应的测试结果， b 对每个测试顺序号下面对应的测试结果和该项目单独5次重复结果的均值相比 比值以百分比形式表示，通过考察百 分比的大小来初步判断携带污染的可能性。 目前的判断标准以正负百分之五作为 判断标准，超过范围时怀疑有携带污染。;试剂针携带污染确认实验;搅拌棒污染：试剂与样本、第一试剂与第二试剂的混 匀需要搅拌棒，而搅拌棒如果清洗不完全，或黏附力增加时，残留试剂可能会对下一检测结果造成影响。 鉴别 对同一份血清标本重复测定GGT 或ALT或 AST20次以上，结果重复性较差且有走高趋势。 原因 搅拌棒特富龙涂层剥落，搅拌棒表面有顽固性 污渍，冲洗水冲洗不充分, 可用无水乙醇擦洗搅拌棒;第15页/共37页;4.清洗系统携带污染鉴别： 在样本测定过程中加做室内质控，部分项目测定异常或者失控 在样本测定过程中以蒸馏水为样本，多次测定LDH、P、Mｇ、TBA，结果重复性不好。 原因： 干燥棒携带污染为多;5.比色杯污染;第18页/共37页;比色杯污染实验方法;不同类型的交叉污染的发生几率由高到低排列： 试剂针携带污染 搅拌棒携带污染比色杯污染 样本针携带污染 清洗系统携带污染;用排除法鉴别不同类型的交叉污染的排列顺序（在保证试剂质量没有任何问题的前提下）：;试剂交叉污染---类型;试剂交叉污染;试剂交叉污染;试剂交叉污染;试剂交叉污染;试剂交叉污染;如何???除试剂间的化学污染;第一类：前一测试项目试剂中含有紧跟其后测试项目所要测定的底物。 此时残留的污染物被带入下一测试中，与该测试的试剂反应，可能会导致结果异常。引起这类交叉污染产生的物质明确，并且可以定量分析。主要项目有： ALT(IFCC法),AST(IFCC法)含高活性的LDH,会影响其后的LDH结果。 CK-NAC、CK-MB-NAC酶偶联测定试剂含高浓度Glucose,会干扰其后的血糖测定，尤其对HK法干扰严重。 Glu(GOD法)、UA(尿酸酶法)、a-HBDH、 TG、 Ca(偶氮胂III法)、 TC(CHOD- PAP)等均采用磷酸盐缓冲液,会干扰位于其后无机盐(P)的结果。 ALP(IFCC-AMP法)，CK-NAC,CK-MB-NAC,TG(GPO法)试剂均含高浓度Mg2+会影响紧随其后的Mg2+的结果。 TC、HDL-C、HDL-C、LDL-C采用胆固醇氧化酶法的试剂含胆酸钠，会干扰紧跟其后的TBA结果，致假性偏高。 以对一硝基苯麦芽七糖苷法(4NP-G4)为底物的AMY试剂含Ca2+浓度高会影响其后测Ca2+的准确性 。 TG，TC试剂中有LIP，会导致LIP的测试结果不真实。 该种类型的交叉污染单试剂终点法的受污染项目测试结果的抬高或降低反映的是搅拌杆的携带污染。因为试剂针携带进来的上一个测试的干扰物会和下一个试剂发生反应，由于携带量小，一般在试剂空白段（2min）即反应平衡。而双试剂项目的测试结果反映的是试剂针和搅拌杆的综合污染。;第二类：前一测试项目试剂中的某种（些）成份干扰紧随其后测试项目所要测定的底物。 引起这类交叉污染产生的物质明确，但和第一类不同的是，前一测试残留并带入下一测试的污染物并非待测物本身，而是能与待测物进行其他的反应或显色物质波段重叠或引起测试条件的变化如PH值改变等，从而带来对测试过程的干扰，这种干扰作用不易进行定量分析。主要项目有： TC、HDL-C、HDL-C、LDL-C最终反应都是过氧化氢和4-氨基安替比林在过氧化酶的作用下产生醌亚胺显色（505nm），因此这些项目间会相互干扰。 TP的检测原理是蛋白质与铜离子生成紫蓝色复合物，该显色物质在546nm有吸收峰，在波段 500nm~600nm都有较大吸收；因此TP试剂可能影响500nm -600nm波段的终点法显色测定（如TC，TG ，UA等）。另外，TBIL（重氮法）和DBIL（重氮法）生成的偶氮物在546 nm 下有吸收峰，因此 TBIL（重氮法）或D-BI