用全自动化学发光免疫分析仪联合PCR扩增仪诊断乙型病毒性肝炎的价值研究.docxVIP

? ? 用全自动化学发光免疫分析仪联合PCR扩增仪诊断乙型病毒性肝炎的价值研究 ? ? 刘元钟 （电子科技大学医学院附属绵阳市中心医院医学检验科，四川 绵阳 621000） 乙型病毒性肝炎是临床上常见的一种疾病，是指患者因感染乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）而发生的肝脏病变。该病的传染性较高。该病患者的临床症状主要是乏力、恶心及肝区疼痛，并可伴有不同程度的肝功能损害，病情严重的患者甚至会发生肝硬化及感染[1]。乙肝两对半是判定是否发生HBV感染的血清免疫标志物。全自动化学发光免疫分析仪可用于检测乙肝两对半。HBV是一种双链DNA病毒。临床上可根据患者血清中HBV-DNA的含量判定其是否患有乙型病毒性肝炎。聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）扩增仪可用于进行HBV-DNA定量检测[2-3]。本文主要是探讨使用全自动化学发光免疫分析仪联合PCR扩增仪诊断乙型病毒性肝炎的价值。 1 资料与方法 1.1 一般资料 本文的研究对象为2020年1月至2021年2月期间电子科技大学医学院附属绵阳市中心医院收治的186例疑似患有乙型病毒性肝炎的患者。在这些患者中，有男性患者105例，女性患者81例；其年龄为15～78岁，平均年龄为（46.50±31.50）岁。本次研究经该医院医学伦理委员会批准。 1.2 方法 本次研究中使用的主要仪器和试剂为全自动化学发光免疫分析仪（品牌：西门子，型号：ADVIA Centaur CP）及配套试剂、PCR扩增仪（品牌：莱恩德，型号：LD-PCR）及配套试剂。在清晨使用真空负压采血管采集患者5 m L的空腹静脉血。将血液标本放在水浴箱中10 m in。用离心机以4000 r/m in的速度对血液标本进行离心处理。将血清低温保存。为所有患者均使用全自动化学发光免疫分析仪进行乙肝五项检测，然后根据检测结果判定其是否患有乙型病毒性肝炎。检测乙肝五项的方法是：按照试剂盒的说明书，使待检血清分别与包被乙型肝炎病毒表面抗原（hepatitis B virus surface antigen，HBsAg）、乙 型 肝 炎 病毒表面抗体（hepatitis B virus surface antibody，HBsAb）、乙 型 肝 炎 病 毒e抗 原（hepatitis B virus e antigens，HBeAg）、乙型肝炎病毒e抗体（hepatitis B virus e antibody，HBeAb）及 乙 肝病毒核心抗体（hepatitis B virus core antibody，HBcAb）的顺磁颗粒结合，并向其中添加吖啶酯标记抗体复合物。用全自动化学发光免疫分析仪观测复合物出现的发光反应。乙肝五项检测结果为阳性的标准为：患者的血清HBsAg定量≥0.5 IU/m L、HBsAb定量＞10.00 MIU/m L、HBeAg定量＞0.100 IU/m L、HBeAb定量＞0.20 IU/m L或HBcAb定量＞0.60 IU/m L。若为这些患者使用全自动化学发光免疫分析仪检测乙肝五项的结果为阳性，则可判定其患有乙型病毒性肝炎。为所有患者均使用PCR扩增仪进行HBV-DNA定量检测，然后根据监测结果判定其是否患有乙型病毒性肝炎。进行HBV-DNA定量检测的方法是：在待检血清中加入100 μL的裂解液，混匀后静置10 min，离心25 s，去除上层清液。在获得的溶液中加入150μL的洗涤液，混匀后静置10 m in，离心25 s，去除上层清液。在获得的溶液中再次加入150μL的洗涤液，混匀后静置10 m in，离心25 s，去除上层清液。在获得的溶液中加入30 μL的反应液，并放入PCR扩增仪中。将荧光猝灭基团标记探针与荧光报告基团标记探针分别添加在HBV-DNA模板的两端，用Taq酶降解探针作为引导。当两个基团的抑制作用消失后，根据该荧光信号测定HBV-DNA的含量。HBV-DNA检测结果为阳性的标准为：患者血清中HBV-DNA的水平＞1000 copy/m L。若为这些患者使用PCR扩增仪检测HBV-DNA的结果为阳性，则可判定其患有乙型病毒性肝炎。 1.3 观察指标 观察为这些患者单独使用全自动化学发光免疫分析仪、单独使用PCR扩增仪、联合使用全自动化学发光免疫分析仪和PCR扩增仪诊断乙型病毒性肝炎的结果、敏感度、特异度和准确度。 1.4 统计学方法 对本次研究中的数据均采用SPSS 21.0统计软件进行处理，计量资料用均数±标准差（±s）表示，采用t检验，计数资料用百分比（%）表示，采用χ2检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。 2 结果 2.1 为这些患者使用全自动化学发光免疫分析仪诊断乙型病毒性肝炎的结果 为这些患者使用全自