肖艳群-分子检测实验室设置、人员及质量管理体系建立要求 上海临检中心.pptxVIP

分子检测实验室设置、人员及质量管理体系建立要求上海市临床检验中心肖艳群 医疗机构临床实验室管理办法卫医发〔2006〕73号医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法卫办医政发〔2010〕194号 《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》总则第二条临床基因扩增检验实验室是指通过扩增检测特定的DNA或RNA，进行疾病诊断、治疗监测和预后判定等的实验室，医疗机构应当集中设置，统一管理。第三条本办法适用于开展临床基因扩增检验技术的医疗机构。第五条以科研为目的的基因扩增检验项目不得向临床出具检验报告，不得向患者收取任何费用。第二章实验室审核和设置 《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》第三章实验室质量管理第十四条医疗机构临床基因扩增检验实验室人员应当经省级以上卫生行政部门指定机构技术培训合格后，方可从事临床基因扩增检验工作。第十五条医疗机构临床基因扩增检验实验室应当开展实验室室内质量控制，参加卫生部临床检验中心或指定机构组织的实验室室间质量评价。室间质量评价结果及时通报医疗机构和相应省级卫生行政部门。 《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》第四章实验室监督管理第十八条省级以上卫生行政部门指定机构对室间质量评价不合格的医疗机构临床基因扩增检验实验室提出警告。对于连续2次或者3次中有2次发现临床基因扩增检验结果不合格的医疗机构临床基因扩增检验实验室，省级卫生行政部门应当责令其暂停有关临床基因扩增检验项目，限期整改。整改结束后，经指定机构组织的再次技术审核合格后，方可重新开展临床基因扩增检验项目。 《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》第二十条医疗机构临床基因扩增检验实验室出现以下情形之一的，由省级卫生行政部门责令其停止开展临床基因扩增检验项目，并予以公告：（一） 开展的临床基因扩增检验项目超出省级卫生行政部门核定范围的（二） 使用未经国家食品药品监督管理局批准的临床检验试剂开展临床基因扩增检验的（三） 在临床基因扩增检验中未开展实验室室内质量控制的（四） 在临床基因扩增检验中未参加实验室室间质量评价的（五） 在临床基因扩增检验中弄虚作假的（六） 以科研为目的的基因扩增检验项目向患者收取费用的（七） 使用未经培训合格的专业技术人员从事临床基因扩增检验的（八） 严重违反国家实验室生物安全有关规定或不具备实验室生物安全保障条件的 国家相关技术指南测序技术的个体化医学检测应用指南（试行）遗传性相关个体化医学检测应用指南（试行）肿瘤个体化治疗检测应用指南（试行）孕妇外周血胎儿游离DNA产前筛查与诊断技术规范 实验室建设硬件实验室设置实验室设备软件人员资质、能力 质量管理体系建立质量管理体系实施实验室信息管理系统 实验室设置普通PCR实验室设置原则上分为四个区：试剂准备区、标本制备区、扩增区、产物分析区如使用全自动扩增分析仪，后两区可合并如使用核酸提取、扩增和产物分析一体化的全自动分析系统，后三区可合并具体实验室分区应根据其所使用的技术平台及检验项目和工作量而定NGS实验室设置原则：工作有序、互不干扰、防止污染、报告及时 普通PCR实验室产物分析区缓冲区扩增区标本制备区缓冲区试剂准备区缓冲区缓冲区工作流向注意事项：各区有独立的缓冲区各区都有水池各区有独立的通风系统（建议有窗户的房间为PCR实验室）标本制备区有冲眼器和生物安全柜 产前筛查与产前诊断（全基因组低拷贝测序技术）测序区缓冲区文库扩增与检测区标本与文库制备区试剂准备区缓冲区缓冲区缓冲区工作流向标本与文库制备区：血浆分离、DNA提取、末段修复与纯化、加“A”与纯化、接头连接与纯化文库扩增与检测区：PCR扩增与纯化、文库浓度检测、pooling 、pooling后文库定量测序区：测序前准备（乳液PCR及磁珠富集）、测序上机、信息分析、报告审核及发放 植入前胚胎遗传学诊断（全基因组低拷贝测序）电泳区缓冲区测序区缓冲区文库检测区缓冲区扩增一区缓冲区WGA制备区试剂准备区缓冲区工作流向缓冲区WGA制备区：全基因组扩增电泳区：DNA检测及结果反馈、DNA打断扩增一区：末端修复及纯化、加“A”与纯化、接头连接与纯化、pooling 、缺口平移文库检测：测序区：扩增前准备（乳液PCR及磁珠富集）、测序仪上机数据分析、报告发放 遗传病诊断+肿瘤诊断与治疗（杂交捕获测序技术+Sanger测序验证）电泳区缓冲区标本与文 试剂准备库制备区 区测序区 文库检测区文库扩增区 杂交铺获区DNA打断区（扩增二区） （扩增一区）缓冲区缓冲区缓冲区缓冲区缓冲区缓冲区缓冲区标本与文库制备区：DNA提取及检测、纯化测OD、末端修复与纯化、加“A”与纯化、Adapter连接与纯化杂交捕获区：Pre-Captured-PCR与纯化、OD值检测及pooling、杂交、洗脱与纯化文库扩增与检测区：Post-Captured-PCR