我国首次发现盖塔病毒感染病毒全抗原.docxVIP

我国首次发现盖塔病毒感染病毒全抗原 甲状病毒素是昆虫传播疾病的重要因素。自然界中大多数甲状病毒通常发生在鸟类、大鼠、爬行动物和栖息地等部位。在自然宿主中常表现为无症状的长期的、高滴度的病毒血症, 以利于蚊虫的传播, 甚至传播到人和家畜引起流行, 发生不明原因的发热和炎症, 包括皮炎、关节炎、肌炎或脑炎、流产等, 严重的可引起死亡。盖塔病毒作为甲病毒属成员之一, 也是我国最早分离到的甲病毒。在我国虫媒病毒研究史上具有重要的地位。1964年首次在海南分离到M1株, 但直到1992年才在美国疾病预防控制中心虫媒中心得到鉴定。2002年在我国涉县第二次分离到至少2株盖塔病毒 (HB0215-3和HB0234)。为了解盖塔病毒对人群的感染情况, 于分离病毒的当年采集了部分正常人群血清进行筛查, 现将筛查结果分析如下。 1 材料和方法 1.1 样品收集 于2002年夏季采集蚊标本的同时, 采集正常人群血标本, 静脉采血, 分离血清, -20℃保存备检。采集地点为涉县各乡村。 1.2 测试指标 盖塔病毒IgM和IgG抗体。 1.3 检测方法 1.3.1 隆抗体酶标结合物的制备 采用抗体捕捉ELISA方法检测IgM抗体。包被抗人IgMμ链, 4℃过夜, 封闭, 加稀释待检血清, 37℃温育, 洗涤后加单克隆抗体酶标结合物, 37℃温育, 洗涤后37℃避光显色。包被液为碳酸钠和碳酸氢钠缓冲液, 洗涤液为0.5% Tween生理盐水, 底物缓冲液为柠檬酸、碳酸氢钠缓冲液, 封闭液为10%胎牛血清的洗涤液, 终止液为2M硫酸, 底物为H2O2和邻苯二胺, 490 nm测定OD值, 判定标准为待检血清OD值与阴性血清OD值之比≥2.1为阳性, 阴性血清孔OD值不足0.05时按0.05计算。 1.3.2 免疫组化检测 采用间接ELISA方法检测盖塔病毒IgG抗体。检测步骤包括包被抗原, 4℃过夜, 洗涤后加待检血清, 37℃温育, 洗涤后加酶标抗人IgG抗体, 37℃温育, 洗涤后37℃显色。包被液、底物缓冲液、终止液、底物及检测条件和结果判定标准均与IgM抗体相同。 1.3.3 病毒对抗 以在涉县分离到的盖塔病毒感染细胞制备病毒全抗原。 2 结果 2.1 血清样品的采集 采血时间为2002年7、8、9月, 采血数量为300份, 男女比例为137∶163。 2.2 血液样品的年龄分布 采血对象年龄范围为1～30岁, 分为6个年龄组, 1岁～, 5岁～, 10岁～, 15岁～, 20岁～, 25～30岁。 2.3 固定组维持治疗后盖塔病毒的血清采集 采血对象分布于涉县3个乡镇的4个村, 在这4个村分别采集102份、89份、84份和25份血清, 其中分离到盖塔病毒的2个乡镇分别采集114份和84份血清。 2.4 d值和阳性率 经实验室检测, 300份血清中只有1份IgM抗体阳性, OD值为0.185, 阳性率为0.30%, 该血清分布在25～30岁年龄组;300份血清中有49份血清IgG抗体阳性, 阳性率为16.30%, IgG抗体阳性血清也分布在大年龄组。 3 盖塔病毒感染人类后是否发生发病 检测结果显示, 在河北省涉县盖塔病毒循环地区, 30岁以下人群盖塔病毒总感染率为16.67% (50/300) , 在自然界循环中, 盖塔病毒不仅感染人而且感染率还比较高, 盖塔病毒感染人类主要在大年龄组人群。但盖塔病毒感染人类后是否引起发病, 临床表现如何, 30岁以上人群感染率多大, 或总人群感染率多大, 有待进一步研究。 由于以往的研究表明, 甲病毒的分离主要出现在南方和新疆等地, 这次在我国北方地区分离到盖塔病毒并发现感染人类, 而且感染率如此之高具有重要的流行病学意义, 为进一步研究盖塔病毒的流行病学奠定了基础和提供了宝贵的资料。 以往海南和广东11个地区盖塔病毒血清抗体检测结果表明, 广东省未发现盖塔病毒抗体阳性者;海南省的6个地区中只有琼中地区发现有盖塔病毒抗体阳性, 阳性率分别为1.95%和2.37%。然而, 此次对河北省涉县人群盖塔病毒感染率调查中, 正常人群的总感染率为16.67%, 显著高于海南琼中地区的感染率, 结果具有重要的流行病学意义。