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- 2023-08-29 发布于广东
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木聚糖酶酶活的测定方法
为了提高纸浆泡沫的性能,降低血浆泡沫药物的消耗,特别是减少漂白过程中产生的有毒污染物,提出了生物酶预处理血浆泡沫(又称生物泡沫)的应用。科学研究业已证明, 木聚糖酶是很有应用价值的且已实现工业化生产的辅助漂白用酶之一。酶活是衡量酶生物活性的重要指标, 该数据通常由酶供应者提供, 但酶活受到酶储存时间、方式等多种因素的影响会有所损失, 因此掌握木聚糖酶酶活的测定方法十分必要。现有的文献关于酶活的测定介绍大多笼统, 本文系统地介绍木聚糖酶酶活的测定方法、原理及具体操作, 供广大应用木聚糖酶的造纸工作者参考。
1 方法的总结和比较
使用分光光度计测定木聚糖酶酶活的方法概括起来有如下3种。
1.1 标准比较法
1.1.1 浓度和正比关系
根据朗伯-比耳定律, 在同等条件下, 一定波长光线透过有色溶液, 溶液吸光度 (A) 与浓度 (c) 成正比关系。因此, 在相同条件下, 分别配制标准溶液和试样溶液, 再在选定的相同波长下, 分别测定A标和A样, 按照下式计算试样溶液的浓度 (c样) , 即
A标/A样=c标/c样
c样=c标·A样/A标(1)
1.1.2 方法
1.1.2. 木糖溶液的配制
3.0 mL反应液里含有1.0 mL 1.0%的木聚糖溶液 (缓冲溶液配制, 以下同) , 0.2 mL蒸馏水及1.8 mL缓冲溶液, 50 ℃反应15 min, 加入一定量
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