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急性毒性试验设计 第一页，共三十六页，2022年，8月28日 一、急性毒性 急性毒性指人或动物一次或24 h之内多次接触外源化学物后，在短期内所发生的毒性效应，包括致死效应。 第二页，共三十六页，2022年，8月28日 一次：指瞬间给实验动物染毒，如经口、经静脉注射染毒。 24 h之内多次：指外源化学物毒性过低，需给予动物较大剂量。 第三页，共三十六页，2022年，8月28日 急性毒性效应出现的快慢和毒性反应的强度与外源化学物的性质和染毒剂量的大小有关。 如：丙烯腈，过氧化二碳酸二环己酯 第四页，共三十六页，2022年，8月28日 丙烯腈经口急性毒性试验设计 第五页，共三十六页，2022年，8月28日 实验目的 评价丙烯腈的毒性作用，求出半数致死量LD50，并根据LD50进行急性毒性分级， 掌握实验动物随机分组的方法和经口灌胃的技术。 观察丙烯腈急性中毒症状；为后续试验提供依据；为毒理学机制研究提供线索。 第六页，共三十六页，2022年，8月28日 器材与试剂 1、实验动物 ICR小鼠（健康成年小鼠） 2、实验器材 灌胃针、注射器、吸管、容量瓶、烧杯、滴管、电子天平、动物体重秤、外科剪刀、镊子 3、实验试剂 丙烯腈、苦味酸酒精饱和液、伊红染液 第七页，共三十六页，2022年，8月28日 实验方法 1、实验动物的选择 2、剂量设计及随机化分组 3、受试物的配制 4、染毒途径的选择 5、毒性反应的观察与LD50的计算 6、急性毒性的评价 第八页，共三十六页，2022年，8月28日 1、物种和品系 对外源化学物毒性反应与人近似易于饲养管理 方便实验 操作易于获得 繁殖生育力强 数量较大能够保障 品系纯化，价格低廉。 一、 实验动物选择 第九页，共三十六页，2022年，8月28日 2、 实验动物的年龄与体重 动 物　　 大鼠 小鼠 豚鼠 兔　 犬 猫 成年年龄（周） 3 2 2 3~4 3~4 3~4 体重（克） 150 15 250 1.5kg 7~15kg 1kg 寿命（年） 2~3 2~3 6~8 4~9 15~20 10~12 第十页，共三十六页，2022年，8月28日 动物数量：动物6组，1-5组为实验组，6组为蒸馏水对照组 性别：雌雄各半 年龄：成年动物 生理与健康状况：未产未孕者、健康动物 实验动物的预检 实验动物的给药前禁食处理。 3、实验动物的一般要求 第十一页，共三十六页，2022年，8月28日 健康动物标志 发育正常、体态丰满、外观无畸形； 被毛浓密、贴顺有光泽、不蓬乱； 胸阔宽阔、脊柱不弓不弯； 眼睛明亮； 表皮无溃疡、无结痂（注意尾巴）； 各天然孔干净、无分泌物； 行动灵活、反应敏捷。 第十二页，共三十六页，2022年，8月28日 实验动物的标记 染色法 编号方法：小鼠头部为1号，顺时针编号，用苦味酸编个位数，用伊红编十位数。 第十三页，共三十六页，2022年，8月28日 第十四页，共三十六页，2022年，8月28日 染色法 优点： 简单方便，不痛苦，无损伤。 缺点： 时间较长时，染色剂易褪色； 标记容易模糊不清。 第十五页，共三十六页，2022年，8月28日  剂量选择及分组 剂量选择 广泛查阅文献资料，估计毒性中值 预试，求出待测化学物0 %~100 %或 10 %~90 %的大致致死剂量范围 设计正式试验的剂量和分组 第十六页，共三十六页，2022年，8月28日 预实验： 总的原则是先用少量动物，以较大的剂量间距染毒，求出粗略的致死剂量范围，即确定受试动物全部致死的最小剂量（b）和全部不致死的最大剂量（a），即求出待测化学物0 %~100 %的大致致死剂量范围，然后在这个剂量范围内按几何级数的间距设计5~7个剂量组，组间剂量呈等比级数（r），其比值为1.2~1.5。进行正式实验。 第十七页，共三十六页，2022年，8月28日 通过预试，找出受试化学物引起动物死亡的大致剂量范围，以此为依据设计正式试验的剂量和分组。 按下式设计剂量组： 式中：r—相邻两组剂量的比值，一般为1.2～1.5， b—最低全致死剂量量， a—最