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3.4 脑膜炎奈瑟氏菌-药敏分析 第*页 不必进行常规的药敏试验,临床耐药率不高。 临床经验性用药通常有:青霉素是首选,对氯霉素,广谱的头孢菌素敏感。 对临床细菌性脑膜炎经验治疗失败的细菌,都应该进行β-内酰胺酶过筛和MIC试验 试验条件 培养基:微量肉汤法:补充离子的MH肉汤,加 2%-5%的冻融马血。 琼脂稀释法:MH琼脂加5%的羊血。 接种物:直接菌落悬滴法,相当于0.5麦氏标准。 孵育: 35±2℃,5%CO2 ;20-24h 当前第30页\共有59页\编于星期日\17点 3.5 脑膜炎奈瑟氏菌-药敏分析 应该在生物安全柜中进行脑膜炎奈瑟菌的相关操作 当前第31页\共有59页\编于星期日\17点 3.5 脑膜炎奈瑟氏菌-案例分析 患者:男,足月出生九天,因无明显诱因出现发热,拟 “新生儿感染”收住入院儿科NICU。 入院后: 血常规:WBC10.01*09/L。脑脊液常规:无色透明,潘氏(+),细胞计数0.316×109/L。 血培养及脑脊液: 血培养阳性,脑脊液培养阴性。送至CDC确认为B群脑膜炎奈瑟菌。 咽拭子培养:3名密切接触者检出一株B群脑膜炎奈瑟菌株(系患者的外祖母)。 药敏试验:对头孢三嗪、 头孢噻肟、 利福平、 氨苄西林、四环素、 米诺霉素、环丙沙星均敏感;而对磺胺甲基异噁唑、复方新诺明均耐药。 治疗过程:予以独立病房隔离治疗,头孢曲松、青霉素抗感染及物理降温后,病情平稳。 3 2 1 4 当前第32页\共有59页\编于星期日\17点 4. 淋病奈瑟氏菌 第*页 4.1 概述 4.2 生物学性状 4.3 鉴别要点 4.4 药敏分析 当前第33页\共有59页\编于星期日\17点 4.1 淋病奈瑟氏菌-概述 第*页 淋病奈瑟菌侵入泌尿生殖系统繁殖,引起化脓性感染。胎儿可经产道感染造成新生儿淋病性急性结膜炎。 实验室在运送淋球菌培养及涂片标本时要注意保温。 出现耐头孢菌素的淋病奈瑟菌是一个重大的公共卫生问题。 人是淋病奈瑟菌的唯一天然宿主。 当前第34页\共有59页\编于星期日\17点 4.2 淋病奈瑟氏菌-生物学性状 培养条件:5%-10%的CO2 ,培养基:改良Thayer-Martin(MTM)培养基(加入万古霉素、多粘菌素、制霉菌素、三甲氧苄二氨嘧啶TMP)。 菌落形态:灰白色、光滑、凸起、半透明。 涂片染色:革兰阴性球菌,肾形或咖啡豆状,凹面相对、成对排列位。涂片操作时不要用力涂擦,应该在玻片上滚动。 第*页 直接涂片报告方式为:找到革兰阴性双球菌(细胞内) 当前第35页\共有59页\编于星期日\17点 4.3 淋病奈瑟氏菌-鉴别要点 第*页 氧化酶实验: 阳性 触酶试验: 阳性 吲哚实验: 阴性 DNA酶: 阴性 硝酸盐还原实验:阴性 麦芽糖: 不分解 与不动杆菌的鉴别 葡萄糖: 分解 脑膜炎奈瑟菌的鉴别 莫拉菌的鉴别 当前第36页\共有59页\编于星期日\17点 4.4 淋病奈瑟氏菌药敏分析 第*页 A组 首选试验 并常规报告 淋病奈瑟菌i ↑头孢曲松 ↑头孢克肟 ↑环丙沙星 ↑四环素 C组 补充试验 选择性报告 大观霉素 试验条件 培养基:纸片扩散法: GC琼脂基础+1%特定的生长添加剂 接种物:直接菌落悬滴法,相当于0.5麦氏标准 孵育: 35±2℃,5%CO2 ;20-24h 2013年CLSI将头孢曲松、头孢克肟、环丙沙星和四环素从试验报告C组移到试验报告A组,并注明不需要进行常规试验, 根据疾病预防控制中心(CDC)指南推荐仅考虑用作治疗失败的备选 。 ↑ 不需要常规试验。 当前第37页\共有59页\编于星期日\17点 4.4 淋病奈瑟氏菌药敏分析 第*页 纸片扩散法测试淋病奈瑟菌,某种抗菌药物试验结果是“中介”,提示结果不可靠,需要重复试验 当前第38页\共有59页\编于星期日\17点 5.布鲁氏菌 5.1 概述 5.2 生物学性状 5.3 检测方法 5.4 药敏分析 第*页 5.3 案例分析 当前第39页\共有59页\编于星期日\17点 5.1 布鲁氏菌-概述 布鲁菌是国家乙类传染病,动物源性疾病,引起变态反应性人畜共患病,实验室注意生物防护。所有操作在生物安全柜,废弃物高压灭菌;结果上报疾控中心; 人感染后,主要表现为发热、发冷、全身痛和多汗,肝肿大,外周非侵蚀性关节炎等,反复发烧呈“波浪热”。先侵入淋巴再入血,症状极不典型容易误诊。 易感人群:畜牧业及皮革加工行业。 国内以羊型布鲁菌病
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