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不同光照条件下磺胺类药物降解性能研究 磺胺类药物是一种合成性苦药物。它具有广阔的抗菌光谱，具有精确的愈合效果，稳定性，易于用复合物和长期保存。长期以来，它被广泛应用于国内外养殖业中的动物疾病的治疗和预防。在欧洲，磺胺类药物是使用最大的药物类抗剂。2000年，磺胺类药物的总消耗量为英国药物类抗剂的21%，其他欧洲国家也达到11.23%。根据2005年化工机械工业学会和制药工业学会的统计数据，中国每年生产约21万吨抗生素，其中9.7万吨（占年总剂量的46.1%）。磺胺类药物是使用最广泛的药物类抗剂之一。动物进入水体后，大部分（约60%-90%）不能被身体吸收，并随动物粪便排出环境。含有残留在农业用地上的动物粪便尿作为肥料流入农田，对土壤生态系统产生负面影响。研究磺胺类药物在土壤中的分解转化规律对评价磺胺类药物的环境风险非常重要。 从20世纪70年代初期起, 即有国内外学者对磺胺类药物在土壤中的降解性进行了研究[9,10,11,12,13,14], 但多为针对某特定药物.本文选用了磺胺嘧啶、磺胺甲嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶和磺胺甲唑等5种使用量较大的兽用磺胺类药物, 采用室内模拟降解法研究其在避光或光照条件下、不同类型土壤中的降解特性, 比较系统地分析了光照和土壤理化性质对磺胺类药物土壤降解的影响, 为我国兽药抗生素的环境风险评价提供依据. 1 实验部分 1.1 土壤、仪器和试剂 供试药物选用5种典型磺胺类药物, 其信息见表1. 内标物质为氘代磺胺甲唑-d4(纯度98.0%, sulfamethoxazole-d4, SMX-d4) , 购于多伦多研究化学品公司 (North York, Ontario) . 供试土壤分别选择江西红壤、太湖水稻土、东北黑土, 土壤均采自未受污染的洁净土壤, 0—20 cm耕作层, 经风干, 研碎, 过20目筛, 备用, 其基本理化性质见表2. 供试仪器:ACQUITYTM超高效液相色谱仪-Quattro Premier XE质谱仪 (UPLC-MS/MS, Waters公司, 美国) ;真空冷冻干燥机 (Virtis公司, 美国) ;RXZ型智能人工气候箱 (宁波江南仪器厂, 中国) ;300型加速溶剂萃取仪 (Dionex公司, 美国) ;CR 22GⅡ离心机 (HITACHI, 日本) ;R-210旋转蒸发仪 (BUCHI公司, 瑞士) . 供试试剂:硫酸、氨水、无水硫酸钠 (均为分析纯, 南京化学试剂有限公司, 中国) ;甲醇、丙酮、乙腈 (均为色谱纯, Merck公司, 德国) ;硅藻土 (10—20目, Dionex公司, 美国) . 1.2 土壤持水性测定 土壤降解实验:分别称取20.0 g上述3种供试土壤于150 m L三角烧瓶中, 每种土壤称取2组, 每组10个重复.均匀、准确地滴加磺胺类药物实验液, 添加浓度为1.00 mg·kg-1, 通风橱中通风挥发干有机溶剂, 将土壤充分混匀, 加水调节土壤水分至饱和持水量的60%, 用透气硅胶塞将瓶口塞紧, 定期检查并补充水分保持土壤持水状态.一组置于人工气候箱中于 (25±1) ℃、湿度75%—85%、黑暗条件下培养;另一组置于人工气候箱中于 (25±1) ℃、湿度75%—85%、光照 (12 h光照, 光照强度1041 Lux;12 h黑暗) 条件下培养.按一定时间间隔定期取样 (0、6、10、15、20、60、90、120、150、180 d) , 测定土壤中药物残留浓度. 1.3 固相萃取-质谱条件 提取:所采样品 (20 g) 加入8.0 g硅藻土混合、干燥后, 装入33 m L的ASE萃取池, 使用加速溶剂萃取 (ASE) 系统, 压力设为1500 psi, 温度80℃, 保持10 min, 60%的冲洗体积, 冲洗60 s.每个土壤样品均用甲醇/丙酮 (50/50, V/V) 循环提取2次, 合并提取液, 待下一步净化处理. 净化:提取液旋转蒸发浓缩至2 m L, 加入40 m L超纯水稀释 (至有机相比例小于5%) , 4 mol·L-1硫酸调节p H值至4.用Oasis HLB小柱进行固相萃取, 将溶液中待测物进行富集净化, 首先6 m L甲醇、6 m L超纯水活化小柱, 上样速度约为3—4 m L·min-1, 上完样后用10 m L的超纯水淋洗HLB小柱, 并在真空条件下干燥30 min, 接着用2 m L的2%氨水/甲醇 (V/V) 洗脱两次, 洗脱液氮气吹干, 最后用20%甲醇/水定容至1 m L, 涡旋振荡1 min, 过0.22μm微孔滤膜, 待UPLC-MS/MS进行分析.上述方法的回收率为磺胺嘧啶91.6%、磺胺甲嘧啶98.2%、磺胺二甲嘧啶97.8%、磺胺二甲氧嘧啶95.3%、磺胺甲唑98.9%