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有助于消化检验方法 1 动物实验 1.1 实验原理 胃肠道是营养物质的摄取、消化与吸收的器官，对食物的消化作用主要是依靠其运动、消化酶的分泌来 完成的。如果某一保健食品能对这一环节或几环节有调节作用，就可能具有有助于消化的作用。 1.2 实验项目 促进消化功能动物实验包括大鼠体重、体重增重、摄食量和食物利用率实验；小肠运动实验；消化酶的 测定等三部分。 1.3 实验动物 根据实验项目可选用单一性别成年小鼠或大鼠。小鼠18－22 克，每组10－15 只，大鼠120－150 克， 每组8－12 只。 1.4 剂量分组及受试样品给予时间 实验设三个剂量组和一个阴性对照组 （或空白对照组），以人体推荐量的10 倍 （小鼠）或5倍 （大鼠） 为其中的一个剂量组，另设二个剂量组，必要时设阳性对照组和模型对照组。受试样品给予时间30 天 （小 肠运动实验受试样品给予时间15－30 天），必要时可延长至45天。 1.5 实验内容 1.5.1 体重、体重增重、摄食量和食物利用率 选用同一性别的大鼠。实验开始时动物体重的差异应不超过平均体重的10%。分不同剂量实验组和阴性 对照组，经口给予受试样品，每周测2 次体重和食物摄入量。实验结束时计算体重、体重增重、摄食量和食 物利用率。 1.5.2 小肠运动实验 选用同一性别的小鼠，分不同剂量实验组、空白对照组和模型对照组，模型对照组用复方地芬诺酯 （或 洛哌丁胺2～4mg/kgBW）造模。可用墨汁或炭末加阿拉伯树胶作为指示剂。经口给予受试样品。实验结束 前禁食不禁水16 小时，于测定当天各实验组和空白及模型对照组再给予一次受试样品或蒸馏水，30 分钟后 各实验组和模型对照组给予复方地芬诺酯 （0.025%－0.05%），空白对照组给予蒸馏水，30 分钟后各组再给予 指示剂，25分钟后断颈处死动物，计算墨汁推进率。 按下式计算墨汁推进率： 墨汁推进长度 （cm） 墨汁推进率 ＝ ×100% 小肠总长度 （cm） 1.5.3 消化酶的测定 选用同一性别的大鼠。分不同剂量实验组和阴性对照组，实验开始时动物体重的差异应不超过平均体重 的10%。经口给予受试样品。实验结束前各组动物禁食不禁水24 小时，采用乙醚 （或异氟烷）麻醉大鼠幽 门结扎法收集一定时间内排出的胃液，测定单位时间内胃液量。取胃液1mL 放入50mL 的三角烧瓶中，加入 0.05mol/L 盐酸溶液15mL 摇匀，放入新鲜制作的蛋白管两根。塞好瓶口，在37℃恒温箱中孵育24 小时，取 - 119 - 出蛋白管，用尺测量蛋白管两端透明部分的长度 （mm），以四端之值求其平均值。计算胃蛋白酶活性和胃蛋 白酶排出量。 2 胃蛋白酶活性单位 （μ/mL）＝四端蛋白管透明部分长度均值 ×16 胃蛋白酶排出量 （μ/h）＝胃蛋白酶活性×每小时胃液量 1.6 数据处理和结果判定 计量资料可用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F 值，F 值F ， 0.05 结论：各组均数间差异无显著性；F 值≥F ，P≤0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法 0.05 进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据 进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。 -1 食物利用率和墨汁推进率资料需进行数据转换，X＝Sin p ，式中P 为食物利用率和墨汁推进率，用 小数表示，然后再进行方差分析。 1.6.1 体重、体重增重、摄食量和食物利用率 实验组与阴性对照组比较，体重、体重增重、摄食量三项指标中任一指