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有助于润肠通便检验方法 1 动物实验 1.1 小肠运动实验 1.1.1 原理 经口灌胃给予造模药物复方地芬诺酯或洛哌丁胺，建立小鼠小肠蠕动抑制模型，计算一定时间内小肠的 墨汁推进率，来判断模型小鼠胃肠蠕动功能。 1.1.2 仪器和材料 1.1.2.1 仪器和试剂 手术剪、眼科镊、直尺、注射器、天平、活性炭粉、阿拉伯树胶、复方地芬诺酯或洛哌丁胺。 1.1.2.2 试剂配制 1.1.2.2.1 墨汁的配制：准确称取阿拉伯树胶 100g，加水800mL，煮沸至溶液透明，称取活性碳 （粉状）50g 加至上述溶液中煮沸三次，待溶液凉后加水定容到1000mL，于冰箱中4℃保存，用前摇匀。 1.1.2.2.2 复方地芬诺酯混悬液的配制：浓度为0.025%。 复方地芬诺酯片，每片含复方地芬诺酯2.5mg，取复方地芬诺酯片25mg （10 片），用研钵研碎呈粉末后 加水至100mL，临用前配制。 1.1.2.2.3 洛哌丁胺溶液的配制 洛哌丁胺剂量为2－4mg/kgBW。依据洛哌丁胺的实用剂量取用，按实验所需浓度配制，可加热待溶质 完全溶解、充分摇匀后使用。 1.1.3 实验方法 1.1.3.1 实验动物 选用成年雄性小鼠，体重18－22g，每组10－15 只。 1.1.3.2 剂量分组及受试样品给予时间 实验设三个剂量组，一个阴性对照组和一个模型对照组。以人体推荐量的10 倍为其中的一个剂量组， 另设二个剂量组，必要时设阳性对照组。阴性对照组和模型对照组同样途径给蒸馏水。受试样品给予时间7 天，必要时可延长至15 天。 1.1.3.3 实验步骤 1.1.3.3.1 模型的建立 给受试样品7 天后，各组小鼠禁食不禁水16 小时。 模型对照组和三个剂量组灌胃给予复方地芬诺酯 （5mg/kgBW）或洛哌丁胺 （2~4mg/kgBW），空白对 照组给蒸馏水。 1.1.3.3.2 指标测定的方法 给复方地芬诺酯或洛哌丁胺后0.5 小时后，剂量组分别给予含相应受试样品的墨汁 （含5%的活性炭粉、 10%阿拉伯树胶），阴性和模型对照组给墨汁灌胃。 25分钟后立即脱颈椎处死动物，打开腹腔分离肠系膜，剪取上端自幽门、下端至回盲部的肠管，置于托 盘上，轻轻将小肠拉成直线，测量肠管长度为 “小肠总长度”，从幽门至墨汁前沿为 “墨汁推进长度”。按下 式计算墨汁推进率： cm 墨汁推进长度 （ ） 墨汁推进率(%) ＝ × 100% cm 小肠总长度 （ ） 1.1.4 数据处理及结果判定 - 124 - 墨汁推进率需进行数据转换，X＝Sin-1 p ，式中P 为墨汁推进率，用小数表示。在进行方差分析时， 需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F 值，F 值F ，结论：各组均数间差异无显著性； 0.05 F 值≥F ，P≤0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的 0.05 数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到 正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。 在模型成立的前提下，受试样品组小鼠的墨汁推进率显著高于模型对照组的墨汁推进率时，可判定该项 实验结果阳性。 1.2 排便时间、粪便粒数和粪便重量的测定 1.2.1 原理 经口灌胃给予造模药物复方地芬诺酯或洛哌丁胺，建立小鼠便秘模型，测定小鼠的首粒排黑便排便时间、 5 或6 小时内排便粒数和排便重量，来反映模型小鼠的排便情况。 1.2.2 仪器和材料 1.2.2.1 仪器和试剂 眼科镊、注射器、分析天平、活性炭粉、阿拉伯树胶、复方地芬诺酯、洛哌丁胺。 1.2.2.2 试剂配制 1.2.2.2.1 墨汁的配制：同小肠运动实验。 1.2.2.2.2 复方地芬诺酯混悬液的配制：浓度为0.05%。 复方地芬诺酯片，每片含2.5mg 复方地芬诺酯。 取复方地芬诺酯片50mg （20 片），用研钵研碎后加蒸馏水至 100mL，临用前配制。 1.1.