蛋白沉淀反应.pptVIP

第一页，共十三页，2022年，8月28日 ?实验目的 ?了解蛋白质的两性解离性质 ?学习测定蛋白质等电点的一种方法 ?加深对蛋白质溶液稳定因素的认识 ?了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义 第二页，共十三页，2022年，8月28日 ?蛋白结构改变可导致其溶解度发生改变 ◆ 在pHpI时，蛋白带负电，蛋白分子相互排斥,蛋白呈溶解状 ◆ 在pHpI时，蛋白带正电，蛋白分子相互排斥,蛋白呈溶解状态 ? 实验原理 ◆ 在pH=pI时，蛋白不带电，蛋白溶解度最低(注:不一定沉淀) ?? 蛋白的可逆沉淀: 结构可以恢复(非变性) ?蛋白带电性质的改变所引起的溶解度发生改变 第三页，共十三页，2022年，8月28日 ?? 蛋白的不可逆沉淀: 结构不可以恢复(变性) ? 蛋白经高温加热 ? 盐析和特定条件下的乙醇作用(低温和短时间) ? 蛋白和重金属作用: 如硝酸银 ? 蛋白和某些有机酸作用:如三氯乙酸 第四页，共十三页，2022年，8月28日 ?试剂和器材 ?试剂 新鲜鸡蛋 0.4%酪蛋白醋酸钠溶液 取0.4g酪蛋白，加少量水在乳钵中仔细地研磨，将所得的蛋白质悬胶液移入200mL锥形瓶内，用少量40-50℃的温水洗涤乳钵，将洗涤液也移入锥形瓶内。加入10mL 1mol/L醋酸钠溶液。把