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烟草对pvy抗性遗传规律的研究 由司马病引起的马尼拉y病毒病，也被称为“脉病”和“脉坏死”，在世界上的烟带中随处可见。PVY除单独侵染外,常与烟草普通花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)混合侵染,在病害流行年份,会造成烟株叶片脉坏死等严重损伤,极大影响了烟叶产、质。目前该病已成为我国烟叶产区重要病害之一,近年来在一些烟区时有发生,给烟叶生产造成了巨大损失。目前的研究报道多集中在对PVY生物学特性、发生规律、株系鉴定、抗源的筛选、抗性基因的定位和抗性形成机制等方面,对品种抗性遗传机制等方面的研究报道较少。由于目前生产上对于烟草病毒病的防治尚无有效的药剂,所以选育抗PVY品种在该病害的综合治理中显得尤为重要。 1 材料和方法 试验在山东中国烟草总公司青州烟草研究所试验场和温室进行。 1.1 材料表面 1.1.1 试验品种 2003年选用P=6个亲本,2004年选用P=5个亲本,亲本基本情况见表1。 1.1.2 烟苗的复壮 PVYN(坏死株系)为中国农业科学院烟草研究所分离提纯,接种到三生-NN(Nicotiana tabacum var.SamsunNN)烟苗上繁殖保存,为了防止保存期病毒致病性发生变异,在使用前15天转接到三生-NN烟苗上复壮1次,备用。 1.1.3 年接收组合 2002年开始在试验地种植供试品种,按完全双列杂交方法杂交,2003年收到组合C= P(P-1)= 6(6-1)=30个杂交种和6个亲本自交种;2004年收到C= P(P-1)=5(5-1)=20个杂交种和5个亲本自交种。 1.2 测试方法 1.2.1 聚乙烯塑料假植育苗 在温室按照烟草托盘育苗方法和植物病毒研究的要求进行育苗操作和管理。先在25 cm×15 cm的塑料盘内播种育苗,待烟苗长至2～3片真叶时,假植在38孔联体聚乙烯塑料托盘内。每个亲本和每个F1代各假植3盘(重复3次)。2003年4月5日播种,5月6日假植;2004年3月1日播种,3月31日假植。 1.2.2 病毒的接种 当烟苗长至5～6片真叶,剔除托盘内长势较弱的烟苗,采用汁液摩擦法进行接种。2003年6月12日接种,2004年4月27日接种。 1.2.3 植株分级标准 待接种烟苗充分发病后,2003年7月1日调查,2004年5月10日调查,按以下标准逐株调查每一盘内发病情况,计算出各参试材料的平均病情指数(表2)。 病害严重度分级参照YC/T39-1996的规定。0级: 全株无病;1级: 心叶脉明或轻微花叶,或上部1/3叶片花叶但不变形,植株无明显矮化;2级: 1/3～1/2叶片花叶,或少数叶片变形,或主脉变黑,植株矮化为正常株高的1/3以上;3级: 1/2至2/3叶片花叶、或变形或主侧脉坏死,或植株矮化为正常株高的2/3至1/2;4级: 全株叶片花叶,严重变形或坏死,病株矮化为正常植株高度的1/2以上至1/3。 病情指数=∑(各级病株或病叶数×该病级数)×100/(调查总株或叶数×最高级数) 1.2.4 数据分析方法 采用的遗传模型: 加性-显性模型,统计分析模型: 随机或固定模型。一般配合力和特殊配合力按照Griffing(Ⅰ)方法,利用DPS进行分析;回归和遗传参数估计按Hayman双列杂交方法,采用王志德编制的程序进行分析。进行统计分析时调查数据按100-观察值计算。 2 结果与分析 2.1 不同抗性试验 抗病性鉴定如表2,参试材料间病情指数存在着极显著差异,亲本抗病性与以前结论相同;抗病组合病情指数低,感病组合病情指数高。两年结果一致,亲本能稳定地把遗传基因传递给后代,表明所选亲本是可用的。 2.2 抗炎剂分析 2.2.1 般配合力方差分析 从表3可以看出,亲本和F1代之间一般配合力(GCA)方差和特殊配合力(SCA)方差达到极显著水平(P=0.0001),表明不同组合F1抗病性状表现差异较大,即亲本在不同的杂交组合中贡献的大小不同。同时,一般配合力方差显著大于特殊配合力方差, GCA/SCA2003年为17.22743,2004为9.66913,说明对PVYN的抗病性以基因的加性效应为主,显性效应处于次要地位,在烟草PVY抗病育种中一般配合力具有更为重要意义。方差分析结果还表明,2003年6个亲本反交效应差异不显著(P=0.2250), 2004年反交效应达到极显著水平(P=0.0000)。这可能由于所选几个抗病品种均含有va等位基因,而va基因在VAM中表达时受到细胞质基因和Rvam2基因影响的原因造成的,因此在育种中反交效应应引起一定的重视。 2.2.2 pvyn抗性高值 综合两年GCA分析结果(表4、表5),不同品种间GCA的大小具有较大的差异。同时根据GCA与0是否有显著差异可知,V.SCR、VAM的GCA在两年均较高,表现稳定,效应值显著大于0,是PVYN