药学微生物（第三版） 课件 1-2-3 实训 血球计数板显微计数法.pptx

实训 血球计数板显微计数法 ;;（二）实训原理 显微镜计数法是指利用血球计数板进行计数，是一种常用的微生物计数法。将经过适当稀释的菌悬液（或孢子悬浮液）放在血球计数板的计数室内，在显微镜下进行计数。可根据在显微镜下观察的微生物数目换算成单位体积内的微生物数目，此法所测得的结果是活菌体和死菌体的总和。 ;图 血球计数板构造图;设5个中方格的总菌数为A，菌液稀释倍数为B，如果是25个中方格的计数板，则： 1 mL菌液中的总菌数=（A/5）×25×104×B=50000AB（个） 同理，如果是16个中方格的计数板，则： 1 mL菌液中的总菌数=（A/5）×16×104×B=32000AB（个） ;三、材料和用具 酿酒酵母、血球计数板、盖玻片、显微镜等。 ;（四）操作步骤 菌悬液制备 以无菌生理盐水将酿酒酵母制成适当浓度的菌悬液。 镜检计数室 在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。若有污物，则需清洗，吹干后进行计数。;加样 将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片，用无菌毛细管将摇匀的菌悬液由盖玻片边缘滴一小滴，让菌液沿缝隙靠毛细管作用自动进入计数室，一般计数室均能充满菌液。注意加样时计数板内不可有气泡。 显微镜计数 加样后静止5min，然后将血球计数板置于显微镜下，先用低倍镜找到计数室位置，然后换成高倍镜进行计数。 及时清洗血球计数板。 ;（五）实训结果 及时记录操作及结果。 （六）思考题 说明血球计数板计数的误差主要来自哪些方面？如何减少这些误差、力求准确？ 血球计数板在洗刷时，为什么不能用硬物洗刷？