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通过转双基因探索提高长春花文多灵生物合成的研究的中期报告 简介： 长春花（Lonicera japonica）是著名的生药植物，其药用部位为花蕾，具有清热解毒、消肿镇痛等功效。文多灵（chlorogenic acid） 是一种重要的长春花药材中的生物活性成分，其具有抗氧化、降血糖等多种药理活性。 本研究旨在探索转双基因技术（CRISPR-Cas9系统）在提高长春花文多灵生物合成过程中的应用效果。 方法： 1.构建了CRISPR-Cas9双基因系统，针对长春花中文多灵生物合成途径中的关键基因进行基因编辑。 2.利用高效快速的基因编辑技术，分别对长春花中文多灵生物合成途径的关键基因进行基因敲除和过表达实验。 3.采用HPLC等手段检测长春花中文多灵含量的变化，分析基因编辑对文多灵含量的调节效应。 结果： 1.成功构建了CRISPR-Cas9双基因系统，基因敲除和过表达实验均获得成功。 2.通过HPLC等分析手段发现，通过基因敲除降低目标基因表达水平后，长春花中文多灵含量显著下降；而通过过表达提高目标基因表达水平后，长春花中文多灵含量显著上升。 结论： 本研究证实了利用CRISPR-Cas9双基因系统进行基因编辑在提高长春花文多灵生物合成过程中的应用效果，为进一步探索基因工程在药用植物中的应用提供了理论依据。