小干扰RNA沉默ARNT基因对人结肠癌HT29细胞生物学特性的影响的中期报告.docxVIP

小干扰RNA沉默ARNT基因对人结肠癌HT29细胞生物学特性的影响的中期报告 近年来，小干扰RNA (siRNA) 技术成为研究基因功能的有力工具。ARNT (Aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator) 是一种被广泛关注的转录因子，其参与了藏红花素等多种物质的代谢与毒性作用，因此 ARNT 的沉默可能会对人类健康产生影响。 鉴于这种情况，本研究旨在探讨小干扰RNA 对ARNT基因的沉默是否会改变结肠癌HT29细胞的生物学特性。 实验方法： 1.设计siRNA 在NCBI网站上查询ARNT基因序列，根据siRNA的设计规则设计合适的siRNA，实验共设计三个siRNA。 2.细胞培养与转染 使用无血清DMEM培养结肠癌HT29细胞，并将细胞分为三组：siRNA组，阴性对照组和对照组。使用Lipofectamine? 2000将siRNA转染入细胞中。 3.靶基因沉默的验证 使用荧光定量PCR技术检测ARNT mRNA的表达水平。 4.测定细胞增殖能力 利用MTT法测定各组细胞在不同处理方式的情况下的增殖能力。 5.细胞周期检测 通过细胞流式细胞术检测细胞周期。 预期结果与意义： 1.成功的沉默ARNT基因，验证ARNT的生物学意义。 2.研究小干扰RNA沉默ARNT基因对结肠癌HT29细胞生物学特性的影响，探索ARNT基因在结肠癌细胞生长、分化、凋亡、增殖、移动以及细胞周期等方面的作用。 3.为探索治疗结肠癌新方法提供新思路。