斜纹夜蛾对有机磷农药抗性研究及乙酰胆碱酯酶基因克隆与分析的中期报告.docxVIP

斜纹夜蛾对有机磷农药抗性研究及乙酰胆碱酯酶基因克隆与分析的中期报告 该研究旨在探究斜纹夜蛾对有机磷类农药的抗性机制及乙酰胆碱酯酶（AChE）基因克隆和分析。本次报告为中期报告，主要介绍实验设计和进展情况。 实验使用的斜纹夜蛾株系来自于野生种群和人工繁殖种群，分别被称为WRA和RA株系。实验分为两个部分：有机磷抗性机制研究和AChE基因克隆与分析。 在有机磷抗性机制研究中，首先进行了有机磷敏感性测试，结果显示WRA株系对有机磷类农药甲基对硫磷（Methamidophos）和乐果（Endosulfan）呈现敏感，而RA株系对上述两种有机磷类农药呈现抗性。接着进行酶活测定，结果显示RA株系中AChE酶活显著下降，而过氧化物酶（Peroxidase）和谷胱甘肽-S-转移酶（GST）酶活则显著提高。结合AChE基因RT-PCR定量结果和AChE酶活测定结果，推断RA株系中AChE基因表达量下调导致斜纹夜蛾对有机磷类农药抗性的发生。 在AChE基因克隆与分析方面，已经完成了斜纹夜蛾AChE基因的克隆和测序。经比对发现，该基因编码279个氨基酸，与同属于鳞翅目昆虫的烟粉虱（Bemisia tabaci）AChE基因高度一致。通过构建质粒载体，成功将AChE基因转染到霉菌株系中，初步鉴定了转染效果。 总体来说，本研究初步探究了斜纹夜蛾对有机磷类农药抗性的机制，并克隆了AChE基因，为深入研究斜纹夜蛾抗性机制奠定了基础。后续将进一步开展AChE基因的功能分析和基因表达调控机制的研究。