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LOH12CR1互作蛋白PSME1的鉴定的中期报告
本实验旨在鉴定人类LOH12CR1基因编码的互作蛋白PSME1,并初步探究其在细胞周期中的作用。此次报告将介绍实验设计、实验进展和预计结果。
一、实验设计
1. 实验目标
- 鉴定LOH12CR1基因编码的互作蛋白PSME1。
- 探究PSME1在细胞周期中的作用。
2. 实验步骤
- 提取人类细胞中的蛋白质,并通过质谱分析鉴定PSME1。
- 利用CRISPR-Cas9技术敲除细胞中的PSME1基因。
- 比较敲除组和野生型组在细胞周期中的差异。
3. 预期结果
- 成功鉴定出LOH12CR1基因编码的互作蛋白PSME1。
- PSME1敲除后会影响细胞周期中某些重要的分子,导致细胞周期的改变。
二、实验进展
1. 蛋白质的提取和鉴定
已经成功地从HEK293T细胞系中提取出蛋白质,并通过质谱分析鉴定了PSME1。结果显示,PSME1在HEK293T细胞中表达水平较高,并且具有鉴定出的特殊的肽段序列。
2. PSME1基因的敲除
已经通过CRISPR-Cas9技术成功地构建出敲除PSME1基因的细胞系,并通过PCR和Western Blot方法鉴定。结果显示,敲除组中PSME1基因的表达已经被完全消除。
3. 细胞周期的观察
正在进行细胞周期的观察实验,预计在敲除组和野生型组中比较细胞周期的差异。目前仍在进行实验中并且暂无结论。
三、预计结果
预计本实验将成功鉴定出人类LOH12CR1基因编码的互作蛋白PSME1,并初步探究其在细胞周期中的作用。通过敲除PSME1基因,我们预计可以发现它对细胞周期中某些关键分子的调控作用,并且可以为深入研究PSME1的功能提供基础。这项研究对于探究肿瘤细胞的生成、发展和治疗都具有一定的理论和实际意义。
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