一种抗ha-cds脱菌-免疫吸附纳米荧光碳点的制备及初步应用.docxVIP

一种抗ha-cds脱菌-免疫吸附纳米荧光碳点的制备及初步应用 建立快速检测方法，快速诊断食物源性疾病的致病性微生物，有助于制定快速处理措施。随着材料科学的快速进展, 一类新型纳米荧光标记材料———纳米荧光碳点 (carbon dots, CDs) , 因其独特的光学特性, 尤其有荧光稳定、生物相容性好等特点, 已开始应用于生物医学领域。在对合成的CDs进行前期生物相容性研究的基础上, 本研究以乙型副伤寒沙门菌为例, 结合抗体耦联磁珠粒的富集作用, 初步探讨建立应用CDs技术快速检测样本中病原微生物的免疫学检测方法。 1 材料和方法 1.1 实验试剂和菌株 1-乙基- (3-二甲基氨基丙基) 碳二亚胺盐酸盐 (EDC) 和N-羟基硫代琥珀酰亚胺 (NHS) 购自Sigma公司;BCA蛋白质浓度测定试剂盒 (增强型) 购自碧云天生物技术研究所;磁珠粒试剂盒购自上海奥润微纳公司。CDs自制, 方法参见文献。抗沙门菌O4因子抗体 (抗O4) 和抗Ha因子抗体 (抗Ha) 均购自宁波天润公司。非特异性抗体正常兔Ig G为本室自制。乙型副伤寒沙门菌株和大肠埃希菌均为江苏大学基础医学与医学技术学院实验中心微生物室保存。免疫亲和分离液用含8mol/L尿素、10 g/L SDS、1 g/L BSA、p H 7.0的PBS。 1.2 leicacssp5 Cary Eclipse荧光光谱仪 (美国V