CRISPR-Cas9系统在临床医学研究的应用与改进.docxVIP

? ? CRISPR/Cas9系统在临床医学研究的应用与改进 ? ? 杨育宾， 黄卫人， 陈 巍 (1)汕头大学医学院药学系，广东， 汕头 515041；2)深圳市第二人民医院医学合成生物学临床应用关键技术国家地方联合工程实验室，广东， 深圳 518036) 锌指核酸酶(zinc finger nuclease，ZFN)和转录激活因子样效应核酸酶(transcription activator-like effect nuclease，TALEN)是两类可编程的作用于基因组编辑的核酸酶。ZFN[1]和TALEN[2]是由序列非特异性DNA核酸酶结构域融合序列特异性DNA识别结构域产生的模块化蛋白质。特异性的DNA识别结构域的构建是极费时间与资金的[3]。近年来，新型的CRISPR/Cas9系统由于组分简单、靶向性高、对靶基因的编辑效率高等特点，逐渐成为临床医学研究中应用最为广泛的基因编辑工具。通过对sgRNA的简单编码，CRISPR/Cas9系统可实现对不同靶标的编辑，极大程度拓展了应用范围。但单一的CRISPR系统只可实现对靶基因的敲除，难以满足实际研究中对基因双向调控的需求。对CRISPR元件的功能进行改造，拓展使用范围和减少应用限制已成为日益关注的重点。本文对CRISPR/Cas9基因编辑技术的应用与其系统元件改造后在基因编辑、活体细胞成像、降低应用障碍等方面的研究进