一种D-对甲砜基苯丝氨酸乙酯的制备方法[发明专利].pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 108642120 A (43)申请公布日 2018.10.12 (21)申请号 201810502755.X (22)申请日 2018.05.23 (71)申请人 山东汉兴医药科技有限公司 地址 261312 山东省潍坊市昌邑市滨海（下 营）经济开发区汉兴路9号 (72)发明人 高建保　王丽丽　胡佳鹏　蔡祖强　 徐健　陈巧红　 (74)专利代理机构 济南瑞宸知识产权代理有限 公司 37268 代理人 徐健 (51)Int.Cl. C12P 41/00(2006.01) C12P 13/06(2006.01) C12N 9/20(2006.01) C12N 15/70(2006.01) 权利要求书1页 说明书5页 附图3页 (54)发明名称 一种D-对甲砜基苯丝氨酸乙酯的制备方法 (57)摘要 本发明公开了一种D-对甲砜基苯丝氨酸乙 酯的制备方法，主要涉及精细化工技术领域，以 DL-thero-p-PMSE为起始原料，在Tris-HCl缓冲 溶液中，在脂肪酶(CAS NO:9001-62-1)的作用 下，对DL-苏式-对甲砜基苯丝氨酸乙酯进行拆 分，DL-thero-p-PMSE分解为D(-)-p-PMSE和L (+)-p-PMSE，所述L(+)-p-PMSE在脂肪酶的作用 下进一步水解，而对D(-)-p-PMSE无作用，从而可 以直接得到D(-)-p-MPSE，使用此方法，所需原料 成本低，操作简单，单一构型的底物产率和光学 纯度高。 A 0 2 1 2 4 6 8 0 1 N C CN 108642120 A 权　利　要　求　书 1/1页 1.一种D-对甲砜基苯丝氨酸乙酯的制备方法，其特征在于：以DL-thero-p-PMSE为起始 原料，在Tris-HCl缓冲溶液中，在脂肪酶(CAS NO:9001-62-1)的作用下，对DL-苏式-对甲砜 基苯丝氨酸乙酯进行拆分，DL-thero-p-PMSE分解为D(-)-p-PMSE和L(+)-p-PMSE，所述L (+)-p-PMSE在脂肪酶的作用下进一步水解，而对D(-)-p-PMSE无作用，从而可以直接得到D (-)-p-MPSE，化学反应式如下 2.根据权利要求1所述的一种D-对甲砜基苯丝氨酸乙酯的制备方法，其特征在于，所述 脂肪酶的获得是通过构建脂肪酶基因工程菌，从菌株中分离出来的脂肪酶基因与载体质粒 进行重组，在大肠杆菌中进行表达，通过基因突变的技术，设计引物并进行PCR，以质粒基因 为模板，添加了组氨酸标签，在没有影响基因表达的前提下，成功的在大肠杆菌中表达，通 过镍柱进行纯化，纯化产物可直接用于拆分过程，其在反应溶液中浓度为5％。 3.根据权利要求1所述的一种D-对甲砜基苯丝氨酸乙酯的制备方法，其特征在于，所述 溶剂为pH值为7.5～8.5的Tris-HCl缓冲溶液。 4.根据权利要求1所述的一种D-对甲砜基苯丝氨酸乙酯的制备方法，其特征在于，所述 反应温度为30℃～40℃。 5.根据权利要求1所述的一种D-对甲砜基苯丝氨酸乙酯的制备方法，其特征在于，所述 反应时间为20～120小时。 6.根据权利要求1所述的一种D-对甲砜基苯丝氨酸乙酯的制备方法，其特征在于，所述 L(+)-p-MPSE的水解产物可以与对甲砜基苯甲醛形成席夫碱中间体，经酯化最终得到消旋 产物DL-thero-p-PMSE。该消旋产物可以作为脂肪酶的底物