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H19对孤雌胚胎干细胞多能性的作用研究的中期报告
H19基因是一个非编码RNA基因,在哺乳动物中广泛表达。很多的研究表明,H19基因在胚胎发育和肿瘤细胞中有着重要的作用。然而,对于H19基因在干细胞中的作用研究还很有限。
最近的研究表明,孤雌胚胎干细胞(parthenogenetic embryonic stem cells,PESCs)与正常的胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)相比,具有更低的多能性。因此,我们进行了一系列的实验,来研究H19基因在孤雌胚胎干细胞中的表达和其对多能性的调控作用。
首先,我们成功地建立了孤雌小鼠的PESCs,并从中筛选出了多能性较高的细胞系。然后,我们检测了这些细胞系中H19基因的表达水平,并发现其在PESCs中表达显著高于ESCs。
接着,我们使用CRISPR-Cas9技术在PESCs中删减了H19基因,并检测了这些H19敲除细胞的多能性。结果显示,H19基因的敲除导致了PESCs的多能性降低,表现为细胞无法形成三胚层体外瘤(teratoma)和不能生成胚胎体细胞(embryonic body,EB)。
我们进一步研究了H19基因调控多能性的分子机制。通过RNA测序和ChIP-seq实验,我们发现H19基因可以通过与Polycomb重组蛋白-2(Polycomb repressive complex-2,PRC2)相互作用来降低多能性相关基因的表达水平。
综上所述,我们的研究表明,H19基因在PESCs中扮演着一个重要的调控因子,能够通过与PRC2相互作用来降低多能性相关基因的表达水平,从而影响细胞的多能性。这一结果对于深入理解H19基因在干细胞多能性调控中的作用,具有重要的意义。
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