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                脂肪酶产生菌的细胞融合选育及其产酶条件优化的中期报告
背景
脂肪酶是一种重要的酶类,在食品工业、生化药品工业、洗涤剂工业等方面具有广泛的应用价值。目前已有不少脂肪酶产生菌被发现,但其产酶能力参差不齐,因此需对其进行选育和优化。
目的
本实验旨在通过细胞融合技术选育出高效产酶菌株,并对其产酶条件进行优化。
方法
1. 筛选菌株:以暴露在石化污染环境中的土壤为基础,通过分离和培养,筛选出具有脂肪酶产生能力的菌株,并通过菌落PCR检测其是否存在脂肪酶基因。
2. 细胞融合:将筛选出的两株脂肪酶产生菌(菌株A和菌株B)进行细胞融合,培养合并后的菌株C。
3. 产酶实验:通过发酵实验对菌株C的产酶能力进行评价,并筛选出产酶能力较强的菌株C1。
4. 产酶条件优化:对菌株C1进行产酶条件优化实验,包括温度、pH、培养基等因素的优化,以得到最佳的产酶条件。
结果
1. 筛选出两株具有脂肪酶产生能力的菌株,经菌落PCR检测,均含有脂肪酶基因。
2. 细胞融合实验得到了合并后的菌株C,其产酶能力与亲本菌株相比有所提高。
3. 产酶实验得出,菌株C1的产酶能力较强。
4. 产酶条件优化实验得出,在37℃,pH 8.0,培养基加入0.1%明胶等条件下,菌株C1的产酶量最高。
结论
通过细胞融合技术选育出的高效产酶菌株C1,在适宜的产酶条件下可产酶量达到较高水平。
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