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大肠杆菌异源生产丁醇途径组装和启动子优化及植物乳杆菌电转条件优化的中期报告
本中期报告主要介绍了大肠杆菌异源生产丁醇途径的组装和启动子优化,以及植物乳杆菌电转条件的优化。
1. 大肠杆菌异源生产丁醇途径的组装和启动子优化
首先,我们根据文献资料和生物信息学分析,设计了异源丁醇途径的组装方案,并进行了基因合成和组装。同时,为了优化途径中的基因表达水平,我们设计了不同启动子控制基因表达,其中包括T7启动子、IPTG诱导启动子和Lambda启动子。重组质粒构建完成后,我们进行了转化和鉴定,初步结果表明,所有基因都顺利构建进去,但IPTG诱导启动子的表达效果最好。
2. 植物乳杆菌电转条件的优化
为了实现对植物乳杆菌的电转,我们首先构建了适用于乳杆菌的表达载体,并采用乳杆菌饱和培养基查找了最适电转条件,包括不同的电压和电极间距。通过优化,我们确定了最佳条件为1800V和2mm的电极间距,达到了较高的转化效率。
综上所述,我们已完成了大肠杆菌异源生产丁醇途径的组装和启动子优化,以及植物乳杆菌电转条件的优化。接下来,我们将进行进一步的表达和纯化优化工作。
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