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羟基喜树碱对人增生性瘢痕成纤维细胞NF-κB的表达影响的中期报告
在人增生性瘢痕(hypertrophic scar,HS)的形成过程中,成纤维细胞活性过高是一个重要的因素。多项研究表明,羟基喜树碱(harmine)具有抑制成纤维细胞增生、促进成纤维细胞凋亡的作用。本研究旨在探索羟基喜树碱对HS成纤维细胞中NF-κB信号通路的影响。
首先,我们通过对HS组织和正常皮肤组织中成纤维细胞、肌动蛋白、核因子NF-κB的染色和免疫荧光检测,确认HS组织中成纤维细胞和NF-κB的表达都比正常皮肤组织中高。接着,我们将HS成纤维细胞分为3组,分别添加不同浓度的羟基喜树碱(10、20、40μmol/L),每组设有对照组。72小时后,采用MTT法、流式细胞术、Western blot分别检测各组成纤维细胞的增殖、细胞周期分布和NF-κB、IκB蛋白的表达。
实验结果显示,羟基喜树碱可抑制HS成纤维细胞的增殖和进入细胞周期S期。与对照组相比,添加10、20、40μmol/L羟基喜树碱的组,其成纤维细胞增殖抑制率分别为23.42%、56.07%、87.63%;细胞周期S期细胞比例分别降低了10.12%、26.88%、39.58% 。同时,添加羟基喜树碱可明显降低HS成纤维细胞中NF-κB和IκB的表达。
综上,羟基喜树碱可以通过抑制HS成纤维细胞增殖、诱导细胞周期停滞、降低NF-κB的表达,从而对HS的瘢痕形成起到一定的抑制作用。
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