猪胰高血糖素样肽-2在毕赤酵母中的分泌表达及其生物活性研究的中期报告.docxVIP

猪胰高血糖素样肽-2在毕赤酵母中的分泌表达及其生物活性研究的中期报告 本研究旨在探究猪胰高血糖素样肽-2（GLP-2）在毕赤酵母中的表达和生物活性，并为其工业化生产提供参考依据。本中期报告主要介绍了以下几点研究进展： 1. GLP-2基因的克隆和构建表达载体 通过RT-PCR方法，成功克隆了猪GLP-2基因，并将其插入pUC19载体中。随后，将GLP-2基因插入表达载体pPIC9K中，构建出pPIC9K-GLP-2表达载体。 2. 毕赤酵母的转化和筛选 将pPIC9K-GLP-2表达载体转入毕赤酵母中，利用选择性压力培养基进行筛选，最终选出了稳定表达GLP-2的菌株。 3. GLP-2的表达和纯化 将稳定表达GLP-2的菌株进行大规模发酵，收获发酵液后进行纯化。通过离子交换层析和透析等步骤，成功获得了高纯度的GLP-2。 4. GLP-2的生物活性测定 利用GLP-2发挥促进小肠上皮细胞增殖、细胞存活的作用，测定了GLP-2的生物活性。实验结果表明，纯化后的GLP-2具有良好的生物活性。 综上所述，本研究成功地将GLP-2基因表达到毕赤酵母中，并获得了高纯度的GLP-2。此外，实验结果表明，GLP-2具有良好的生物活性，为其在工业化生产中的应用提供了可行性依据。