Ames试验在水质检测方面的应用.docxVIP

· 66 · 微 生 物 学 通 报 　　　　　　　　　　　　2002 年 29 (3) 采用 SD S2PA GE 分析发酵液的菌体和上清 液实验表明 : 该酶基因的表达产物可以分泌到 细胞外 , 表达量占菌体蛋白的 12 %左右 ; 而类 似报道中纳豆激酶是以融合蛋白的形式表达 , 表达量占菌体蛋白的 1512 %[10 ] 。表达动态研 究表明 : 重组菌在 30 ℃培养 6h 后 , 在 42 ℃诱 导 5h , 可以获得较高的表达量 , 相当于 120 个 尿激酶单位/ mL 菌液 , 是有关报道的 2 倍[10 ] 大肠杆菌表达外源基因产物多数是以包涵体形 式分泌至周质空间 , 本实验所获得表达产物大 部分存在于发酵液中 , 即使通过超声波破碎细 胞壁后也不能令产量提高 , 证明该重组子为分 。 图 5 　重组质粒在 E1coil HB101 中的稳定性 　分离稳定性 , 　结构稳定性 ——◆— □ 泌表达型 , 究其原因 , 可能是由于 PCR 扩增的目的片段还包含有信号肽序列 , 可令表 达产物分泌至胞外。 重组质粒的稳定性实验表明 : 该质粒具有良好的分离稳定性 , 而结构稳定性较差 , 分析原因 , 可能是由于表达载体 pBV220 携带人工构建的 P P 串联启动子 , 而此类启动 R L 子极易发生外源基因的缺失 , 因此重组质粒的结构稳定性有待提高。 参 考 文 献 [1] 须见洋行 1 化学 と生物 1 1991 , 29 (2) : 119～1231 [2] 永井利郎 1 日本食品科学工学会志 1 1999 , 46 (2) : 39～441 [3] 傅 　利 , 李荣萍 , 李 　晶 , 等 1 生物工程进展 , 1997 , 17 ( 3) : 31～331 [4] Nadamura T , Youher Y, Eiji I1 Biotech Biochem1 1992 , 56 (11) : 1869～18711 [5] 李建武 1 生物化学原理和方法 1 北京 : 北京大学出版社 1 1994 : 275～2771 [6] 罗立新 , 凌均建 , 黄志立 , 等 1 华南理工大学学报 , 2000 , 28 (10) : 59～621 [7] 原敏夫 , 田所优子 , 里山俊哉 1 日本食品科学杂志 , 1996 , 43 (2) : 173～1751 [8] 邱晓颖 , 朱红惠 , 卢秋雁 , 等 1 高技术通讯 , 1998 , 16 (1) : 52～551 [9] 吴乃虎主编 1 基因工程原理 (上册) 1 北京 : 科学出版社 , 1999 : 229～2301 [10] 张淑梅 , 张云湖 , 赵晓祥 , 等 1 中国生物化学与分子生物学报 1 1999 , 15 (6) : 912～9151 Ame s 试验在水质检测方面的应用 林朝晖 (广州市自来水公司 　广州 　510160) 摘要 : 近年来 , 水体污染日趋严重 , 各国学者从氯化后饮水中分离出多种致突变、致癌物 质 。为此我们采用 Ames 试验 , 对珠江流域主要取水点的水源水和对应自来水中的有机致 突变物污染情况进行了研究。研究表明 , 部分取水点的有机致突变物污染较严重 , 并且氯 化消毒后自来水的致突性大于水源水的致突性。因而 , 加强饮水中致突变物质的检测 , 改 进净水消毒剂和净水流程很有必要。 关键词 : 鼠伤寒沙门氏菌 , 野生型 , 突变型 , 致突变 , 氯化消毒 中图分类号 : Q93 　　文献标识码 : A 　　文章编号 : 025322654 (2002) 0320066204 　收稿日期 : 2001204225 , 修回日期 : 2001206230 ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved. 2002 年 29 (3) 　　　　　　　　　　　　微 生 物 学 通 报 · 67 · THE APPL ICATIO N OF AMES TEST IN THE EXAMINATION OF WATER LIN Zhao2Hui ( Guangzhou Water Supply Company , Guangzhou 　510160) Abstract : In recently , the pollution in water is more and more serious. Scientists detected some carcinogens in the chlorinated drink water. We detected the mutation of the sour