Ames试验在泸州市饮水致突变性检测中的应用.docxVIP

　泸州医学院学报 　　2003 年 　　第 26 卷 　　第 6 期 　Journal of Luzhou Medical College 　Vol . 26 　No. 6 　2003 495 Ame s 试验在泸州市饮水致突变性检测中的应用 1 张青碧 ,陈志群 ,甘仲霖 ,衡正昌 ,汤 　艳 (泸州医学院公共卫生系 ,四川泸州 　646000 ; 　 四川大学华西公共卫生学院) 1 　　摘 　要 　目的 :为了检测泸州市饮水氯化消毒副产物的致突变性。方法 :采用 Ames 试验分别对泸州市南郊水 厂的水源水、出厂水、末梢管网水的有机浓集物的致突变性进行检测。结果 :水源水的有机浓集物的 Ames 试验呈 阴性 ,出厂水和末梢管网水的有机浓集物的 Ames 试验呈阳性反应 。结论 :通过饮水氯化消毒虽然减少了水中致病 微生物的作用 ,但是增加了氯化消毒副产物的致突变性。 关键词 　Ames 试验 ;饮用水 ;氯化消毒副产物 ;突变性 中图分类号 　R123 　　　　　文献标识码 　A 　　　　　文章编号 　1000 - 2669(2003) 6 - 0495 - 03 　　随着国家工农业的迅速发展 ,人们生活饮用水 正受到日益严重的污染 ,以地面水为水源的源水和 经氯化消毒的自来水中普遍存在致突变性有机污染 物[1～3 ] ,泸州市区地处长江、沱江的交界处 ,受到上 游城市工农业废水的污染 ,泸州市区人民主要以长 江水为生活饮用水水源 ,但对该地区的生活饮用水 的致突变性的研究未见报道 ,因此本文采用传统的 Ames 实验对该地区水的氯化消毒副产物的致突变 性进行研究 。 保存备用 。 1. 2 　样品的稀释 此次实验有泸州南郊水厂水源水、出厂水、自来 水 3 个样品。取一定体积的水样浓集物 ,用 DMSO 按一定比例稀释成以下浓度 (即每 mL 稀释液相当 于原水的量) 分别为 60LΠml ,30LΠml ,1. 5LΠml ,0. 75LΠ ml 。 1. 3 　Ames 实验 按照标准平板掺入法进行操作[5 ] 。选用 TA98 , TA100 菌株 ,所有的菌株经鉴定合格后使用。TA98 阳性对照试剂为 2μgΠml 的 3 - 硝基 9 - 葱酮 ( TNO) , TA100 阳性对照试剂为 15μgΠml 的叠氮化钠(NaN3) 。 每个水样设 4 个浓度 ,分别为 60LΠml ,30LΠml ,1. 5LΠ ml ,0. 75LΠml ,每个浓度作 3 个平行平板 ,重复试验 1 次 。以每皿的回变菌落数来反应待测物的致突变 性。 1 　材料与方法 1. 1 　水样浓集 于 2002 年 12 月枯水期采集泸州市水源水、出 厂水、末梢管网水(自来水) 各 200L 进行过滤 。采用 固相萃取法[4 ] ,以 XAD - 2 型树脂作为吸附树脂进 行水样浓集。使用前用重蒸甲醇、丙酮、乙醚各提取 树脂 8 小时 ,用精制过的 XAD - 2 型树脂装柱过滤 , 流速为 100mlΠmin ,过滤时间为 38 小时 ,然后用乙醚 洗脱 ,减压挥干 ,最后用二甲亚砜 ( DMSO) 定容至 2ml (1 毫升该溶液相当于 100L 原水样) ,置 4 ℃冰箱 2 　结 　　果 计数每个平皿的回变菌落数 ,求出 3 个平行样 的均数和标准差 。现将各组的实验数据列表如下 。 表 1 　泸州地区水样的 Ames 试验结果( TA98) 平均回变菌落数(个Π皿) ?x ± s 自来水 浓度(LΠ皿) 受试物 水源水 24 ± 4. 89 17 ± 2. 35 20 ± 5. 23 14 ± 4. 56 出厂水 102 ± 57. 13 79 ± 20. 93 61 ± 17. 8 37 ± 6. 4 97 ± 66. 33 70 ± 21. 83 水样 6. 0 3. 0 　 　 1. 5 54 ± 15. 4 　 0. 75 34 ± 7. 2 自发回变 阳性对照( TNO) 24. 5 ± 3. 96 2450 ± 165. 9 　注 : 3 与阴性对照相比 ,每皿回变菌落数增加一倍以上 作者简介 :张青碧(1968 - ) ,女 ,硕士。 ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved. 泸州医学院学报 　　2003 年 　　第 26 卷 　　第 6 期 　 Journal of Luzhou Medical College 　Vol . 26 　No. 6 　2003 　 496 表 2 　泸州地区水样的 Ames 试验的结果( TA100) 平均回变菌落数(个Π皿) ?x ± s 自来水 浓度(LΠ皿) 受试物