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- 2023-10-07 发布于广东
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mir-200c在人胃癌组织中的表达改变及其临床意义
众所周知,mirna是生物研究的热点。人类mirna作为肿瘤基因或肿瘤基因的作用,调节肿瘤基因的产生和相关信号的来源,在肿瘤的发生、发展和预后中发挥重要作用。研究表明, miRNA-200c通过靶基因ZEB1上调RASSF1A表达, 从而抑制乳腺癌细胞的EMT效应, 且miR-200c在乳腺癌细胞和乳腺癌干细胞中表达下调。以上研究结果提示, miR-200c表达下调可能在肿瘤的发生发展过程中起重要作用。
1 材料和方法
1.1 组织芯片治疗
正常胃黏膜组织样本40例, 胃癌组织样本121例, 上述组织芯片均由中山大学肿瘤防治中心惠赠。
原位杂交探针:miR-200cmiRCURYTM LNA custom detection probes (美国Exiqon公司) 。
1.2 无酶实验设计
60℃烤片2h, 二甲苯脱蜡, 第1缸15min, 第2缸25min, 无水乙醇脱二甲苯5min;100%、85%、70%梯度酒精复水各5min, 无酶水洗;3%过氧化氢室温处理8min, 无酶水洗1min×3次;3%胃蛋白酶37℃消化20min, PBS水洗5min×3次, 无酶水洗1min×1次;1%多聚甲醛室温固定10min, 无酶水洗1min×3次;滴加适量预杂交液以覆盖组织, 55℃预杂交2h;将miR-200c探针按说明稀释于灭
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