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- 2023-10-07 发布于上海
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尘螨变应原特异的重组人单抗IgG Fab片段的制备及生物学活性研究的中期报告
本研究的主要目的是制备尘螨变应原特异的重组人单抗IgG Fab片段,并研究其生物学活性。在研究的过程中,我们已经完成了以下工作:
1. 构建重组人单抗IgG Fab片段的基因表达载体
根据人IgG重链和轻链的序列,我们设计并合成了相应的引物,提取了人外周血淋巴细胞中的mRNA,并利用反转录酶及聚合酶链反应技术,扩增出了重链和轻链的cDNA。随后,将两个cDNA片段克隆到同一个表达载体中,构建出了重组人单抗IgG Fab片段的基因表达载体。
2. 制备重组人单抗IgG Fab片段
通过转染CHO细胞,我们成功地表达出了重组人单抗IgG Fab片段。随后,采用蛋白A亲和层析法纯化出了目标蛋白。
3. 鉴定重组人单抗IgG Fab片段的生物学活性
我们运用ELISA实验验证了重组人单抗IgG Fab片段的结构和活性。结果表明,该片段能够特异性地结合尘螨变应原,而对其他物质无反应。
总的来说,我们已经成功制备出了尘螨变应原特异的重组人单抗IgG Fab片段,并证实了其生物学活性。接下来,我们将进行更多的实验,进一步验证该片段的临床应用价值。
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